小鼠模型的肠道菌移植（肠道微生物小鼠灌胃）服务介绍

引言

近年来微生物组的研究颠覆了人们对许多疾病的认知，已经证实肿瘤、消化、精神、代谢、心血管等多种疾病均与肠道菌群变化密切相关。肠道微生物是存在于动物消化道内的庞大且复杂的细菌群落，它们在宿主的健康和疾病状态中扮演着重要角色。

通过研究这些微生物，能够更好地理解饮食、药物以及环境因素如何影响宿主的生理过程，包括免疫反应、代谢功能以及神经系统的活动。

将单菌或菌群移植到小鼠体内，基于小鼠模型菌群移植的实验结果，评估特定微生物对宿主的影响，或者研究药物、营养物质等通过口服途径对生物体的作用。这类实验对于理解微生物与宿主之间的相互作用、开发新的治疗方法或疫苗具有重要意义，被广泛应用于研究人类疾病的动物模型中，如肥胖症、2型糖尿病、炎症性肠病等。

关键词：肠道微生物、小鼠灌胃、定量菌液、厌氧菌培养、培养基定制

问题难点

利用无菌小鼠进行粪便移植或特定微生物的灌胃实验，可以更准确地探索单个微生物或整个微生物群落对宿主的影响。但实验过程也面临着一些不可避免的问题：

厌氧环境：人体结肠中的微生物群落最为丰富，结肠特殊的结构和功能机制，决定了多数肠道微生物是严格厌氧的，要解决厌氧培养条件。

营养需求：很多肠道微生物对于营养要求很高，增加了培养基配置的复杂性。

特性稳定：将肠道菌控制到合适量级，确保有效但不过度影响，且保持批次菌株的稳定一致，确保结果的可重复性较为困难。

分离纯化：由于肠道微生物组的高度复杂性，很难将单个种从混合群分离出来单独培养。

为了更好服务科研人员日益增长的肠道微生物研究需求，同时结合小鼠灌胃实验中的常见问题，我们针对性地推出了肠道微生物小鼠灌胃辅助服务。

肠道微生物小鼠灌胃

服务介绍

微生物样品经过处理后，通过灌胃的方法，将微生物由小鼠口腔直接注入到小鼠胃中，使其在小鼠肠道定植，从而实现无菌小鼠肠道微生物移植，研究微生物在无菌小鼠的功能和作用机制等。

肠道微生物研究潜力巨大，但是研究人员不得不面对的一个问题是，多数肠道菌的培养均要求严苟厌氧条件，尤其对于灌胃的菌量来说，由厌氧袋、厌氧罐或者简易厌氧手套箱（厌氧工作站）提供的厌氧环境，远远不能满足需求。

即使花费大价钱采购了昂贵的厌氧设备，还要处理娇贵的厌氧菌株，一个不小心菌株就死掉了，及其影响心态，浪费时间精力，非常耽搁科研进度。因此，我司推出了肠道菌的菌液定制服务，预先将菌株制备为实验所需的浓度，并将其分装自合适的厌氧管之中，方便科研人员取用，并且尽量降低取用对于菌株本身的活性损失。

常见问题解答：

我是新手小白，如何进行小鼠灌胃实验？

若团队有相关研究基础，最佳方法是向具备小鼠灌胃操作经验的同仁沟通；对于没有条件和经验的客户，我们撰写了一篇灌胃实验的通用操作教程（大鼠亦可参考），仅供学习参考。《小鼠灌胃实验的通用操作教程》（访问链接：https://www.huizaobio.com/article/a303.html）

如何挑选肠道菌移植（小鼠灌胃）的目标菌株？

通常，客户依托自身的基金项目或研究课题，均提前选取了感兴趣的目标菌株；若暂未确定菌株，我们摘录了几篇相关研究中筛选分离的肠道菌，以及这些菌株的一些相关信息，供大家参考、研究和探索。

文章综述 | 人类肠道微生物组成及其在疾病早期诊断中的意义（访问链接：https://www.huizaobio.com/article/a285.html）

人类肠道微生物群（马赛大学） （访问链接：https://www.huizaobio.com/article/a282.html）

人类肠道微生物群（桑格研究所） （访问链接：https://www.huizaobio.com/article/a283.html）

miBC:小鼠肠道微生物群分离保藏项目 （访问链接：https://www.huizaobio.com/article/a284.html）

人体肠道微生物

如何设置肠道菌移植（小鼠灌胃）的菌液浓度？确定浓度后，菌株培养时如何进行浓度定值？

菌株的采样方法、温度和氧气暴露等，均会对肠道菌定植产生影响，因此菌量只是影响定植的一个环节，一般没有严格要求。通常来说，菌液浓度达到10^8-10^9cfu/ml，可满足大部分实验要求。定植周期为2-4周，依据预实验结果，调整灌胃剂量和周期。

“麦氏比浊法 + 平板计数法”可解决多数情况下的菌液定量问题，然而很多厌氧菌缺少合适的固体培养基，或者固培成本过于高昂，因此并不适合平板计数。另一方面，厌氧菌稀释后涂板，这种情况下，仅能用麦氏比浊法定量级数，无法确定精确系数。

如何挑选肠道菌移植（小鼠灌胃）的溶液/溶剂？

首先，无论使用什么溶剂，实验都需要做好对照组，以排除溶剂影响；溶剂的理化性质，如pH、粘稠度、渗透压等都会对实验产生影响，需要慎重考虑。例如粘稠度过高可能会导致注射用针头的堵塞，粘在针头外的药物还有可能进入气管，造成给药剂量不准确，甚至对实验动物的致命伤害。pH值会影响吸收度，以及对组织的伤害，过酸或过碱有可能导致实验动物的腹泻、呕吐、组织溃疡或坏死，及实验动物的痛苦，建议pH控制在7.3-7.4。

常用的微生物溶剂，及其优缺点如下：

磷酸盐缓冲液（PBS）：PBS是一种等渗、弱缓冲、无毒溶液，pH接近中性，能最大降低刺激菌体，而且不会干扰大部分生物实验。但若要维持微生物长期存活，PBS可能不是最佳选择。

生理盐水（0.9% NaCl）：生理盐水是等渗溶液，不会引起组织损伤或应激反应。成本低廉，适合大规模制备。但同样的，缺乏必要的营养成分。

培养基：可为微生物提供必需的营养成分，有助于保持其活力和功能状态。对于一些苛养菌来说，使用专门的培养基可能是唯一的选择。缺点是可能引入额外变量，某些成分甚至会被宿主吸收或改变肠道环境，间接影响实验。

脱脂牛奶或乳清：富含蛋白质和其他营养物质，且能保护微生物免受胃酸影响，常用于益生菌的递送。缺点：可能会被消化道酶分解，释放副产物干扰实验。

甘油（10-20%）：甘油作为一种保护剂，可以在低温下长期保存微生物。缺点：高浓度甘油可能会对损伤菌体，甘油具有甜味，可能会产生非预期食物摄入。

表面活性剂（如Tween 80）：表面活性剂可以帮助分散微生物，防止它们聚集成团，提高分布均匀性和剂量准确性。适用于那些容易形成沉淀或聚集的微生物制剂。缺点是可能会影响微生物的生存能力或改变其表面特性。可能会与宿主的免疫系统发生相互作用，从而影响实验结果。

人体肠道微生物

定量菌液的保存期限为多久？如何保证肠道菌移植（小鼠灌胃）定量菌液的活性？

以粪便普雷沃氏菌（Prevotella copri）为例，经实验室测试验证，在如下条件：厌氧玻璃管分装，PBS溶剂，浓度10^9cfu/ml,4℃冰箱保存；活性至少可维持1周左右，期间会有正常的代谢死亡，将菌液转移至新鲜培养基，活性仍能满足扩培需求。

因此，考虑到实验过程中的其它损耗，建议定量菌液最好5天内使用。

为保证活性，最佳方法是现配现用。但是受限于时间、精力和实验条件，许多老师无法做到现配现用。因此，我司推出批次发货服务，单次提供4-5天实验的菌液用量，最大程度保证菌体活性。

仅靠厌氧袋或厌氧罐，能否独立制备肠道菌的定量菌液？

很有难度。不仅是培养方面的难度，重悬定量也很有挑战性。

厌氧手套箱

菌株没有合适的液体培养基，如何制备菌悬液？

可采用平板洗脱的方法，收集菌体，制备菌悬液，缺点是大量制备定量菌液时，需要培养更多的平板，不仅周期更长，也增加了污染风险。

定制服务如何收费？

定制服务的费用，主要与3个因素相关：培养难度、定量浓度和菌液总量。其中，培养难度越高，试剂耗材成本越高，并且可能存在失败风险；而定量浓度和菌液总量越高，原液需求越大，物料和时间成本相应更高。比如，部分厌氧菌原液浓度很低，制备同等浓度的定量菌液，可能需要培养出数倍，甚至数10倍数量的原液。同时，批次多了，运输费用也要同步上升。

以肥胖相关的肠道菌嗜黏蛋白阿克曼菌 Akkermansia muciniphila举例：

1、定量浓度10^9cfu/ml，PBS溶剂，10ml，1支装，标准费用：3000元；

2、定量浓度10^9cfu/ml，PBS溶剂，单次邮寄6ml（2ml/支，3支装），分8次，总量48ml，标准费用：8000元；

根据未来的服务客户过程，我们会不断收集问题反馈，将高频率提问不定期更新于此。

【相关资源】

名称：嗜黏蛋白阿克曼菌 | Akkermansia muciniphila

菌株编号：HZB366847, ATCC BAA-835, DSM 22959

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最近更新日期：2025-04-29

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