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产品名称 | Non-Enzymatic Cell Dissociation Solution |
别称 | |
形态特征 | |
特征特性 | 试剂 |
生长特性 | |
主要用途 | 胰蛋白酶是收获培养细胞时最常用的酶。当需要非蛋白质和无动物成分的材料时,需要采用非酶方法。 ATCC 非酶细胞解离溶液是一种无菌、不含酚红的溶液,由专有的螯合剂混合物组成,是蛋白质消化酶的优化替代品。 |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | 每种类型的细胞或细胞系都以独特的方式对非酶细胞解离溶液做出反应。为了获得最佳结果,请在解离过程中经常观察细胞以防止损坏。有关细胞特定信息,请参阅细胞或细胞系随附的产品表。注意:对于高度贴壁的细胞类型(例如角质细胞),不建议使用非酶细胞解离溶液。使用前将 D-PBS 恢复至室温。在与细胞一起使用之前,将非酶细胞解离溶液和完全生长培养基加热至 37°C。对于每个容器,小心地吸出用过的介质而不干扰单层。使用的冲洗剂类型取决于完全生长培养基的成分;继续执行以下选项之一。选项 1:如果细胞培养基含有血清,则应在添加非酶细胞解离溶液之前用 D-PBS 冲洗每个烧瓶两次。选项 2:如果使用无血清培养基,则在添加非酶细胞解离溶液之前,应使用 D-PBS 中的 1 mM EDTA 冲洗每个培养瓶两次。每 25 cm2 使用 1.5 mL,向每个容器中添加适当体积的非酶细胞解离溶液(例如,每个 T-25 容器将用 1.5 mL 非酶细胞解离溶液解离)。轻轻摇动每个烧瓶,以确保非酶细胞解离溶液完全覆盖细胞。将烧瓶放入 37°C、5% CO2 的培养箱中。每 5 至 10 分钟在显微镜下观察一次细胞。当细胞相互拉开并围成一团时,从显微镜中取出烧瓶,并从多个侧面轻轻敲击培养容器,以促进细胞从烧瓶中分离。 (某些细胞类型可能需要更用力的敲击。)当大多数细胞似乎已分离时,通过重复移液将细胞分散到悬浮液中。将解离的细胞转移到无菌离心管中并放在一边,同时处理培养容器中剩余的细胞。将 3 至 5 mL D-PBS 添加到组织培养容器中,以收集可能留下的任何其他细胞。将细胞和 D-PBS 转移至含有非酶细胞解离溶液解离细胞的离心管中。根据需要重复步骤 8 和 9,直到从所有容器中收集到所有细胞。将细胞以 125 xg 离心 5 至 10 分钟。不要过度离心细胞,因为这可能会导致细胞损伤。离心后,细胞应形成干净的松散沉淀。吸出中和的解离溶液,并将细胞沉淀重悬于 2 至 8 mL 新鲜、预热的完全生长培养基中。计数细胞并以推荐的密度接种新的培养容器。将新接种的容器放入 37°C、5% CO2 的培养箱中,并培养至少 24 至 48 小时,然后再进一步处理细胞。 |
传代方法 | |
规格 | 100毫升 |
保存说明 | 2°C 至 8°C |
注意事项 | 更多信息请前往ATCC官网获取 |
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