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Fibroblast Growth Kit-Serum-free

  • 货号 : HZB391897
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ATCC PCS-201-040

  • 规格 :
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Fibroblast Growth Kit-Serum-free
别称
形态特征
特征特性 试剂
生长特性
主要用途 您的实验设计将决定应使用哪种成纤维细胞生长试剂盒。成纤维细胞生长试剂盒 - 无血清的使用为人类成纤维细胞的无血清培养创建了完全确定的培养基。通过 10 次群体倍增，增殖率等于或大于使用 FBS（浓度范围为 2% 至 10%）补充的培养基。 （在无血清条件下，10次群体倍增后，增殖速度可能会减慢。）在这些条件下，可以建立无血清人类饲养细胞层用于干细胞培养，或作为研究伤口愈合、皮肤老化、基因传递的模型系统、毒理学和细胞生物学的基本问题。与成纤维细胞生长试剂盒 - 无血清 (ATCC PCS-100-040) 相比，使用成纤维细胞生长试剂盒 - 低血清 (ATCC PCS-100-041) 将支持更快的增殖速度。使用补充有成纤维细胞生长试剂盒-低血清 (2% FBS) 的成纤维细胞基础培养基培养时，尚未确定原代成纤维细胞群体倍增的上限。在这些条件下，原代成纤维细胞培养物已维持了 30 多次群体倍增，当用作饲养层支持人类 ES 细胞培养时表现良好。
培养条件
培养基
使用方法 拆包和储存说明 检查所有容器是否有泄漏或破损。将基础培养基储存在 2°C 至 8°C 的温度下，将生长试剂盒储存在 -20°C 的非自解冻冰箱中，或者长期储存在 -70°C 的冰箱中。如果到达时解冻，生长试剂盒应储存在 2°C 至 8°C 下，并在收到后 72 小时内添加到基础培养基中。完全生长培养基的制备 从冰箱中取出一份生长试剂盒；确保所有组件的盖子均已拧紧。在添加到基础培养基之前解冻生长套件的组件。在添加到基础培养基之前，需要在 37°C 水浴中加热 L-谷氨酰胺组分，并摇动以溶解任何沉淀物。从冷藏处获取一瓶成纤维细胞基础培养基 (480 mL)。用 70% 乙醇喷洒所有生长套件组件小瓶和基础培养基瓶的外表面，以净化它们。使用无菌技术并在层流罩或生物安全柜中工作，每次转移时使用单独的无菌移液器将每个生长套件组件的体积（如表 1 或 2 所示）转移到基础培养基瓶中。表 1. 如果使用无血清成纤维细胞生长试剂盒 (ATCC® PCS-201-040)，请按所示顺序添加每种成分的指定体积。成分 体积 最终浓度 L-谷氨酰胺 18.75 mL 7.5 mM 氢化可的松半琥珀酸酯 0.5 mL 1 µg/mL HLL 补充剂 1.25 mL HSA 500 µg/mL 亚油酸 0.6 µM 卵磷脂 0.6 µg/mL rh FGF 碱性 0.5 mL 5 ng/mL rh EGF / TGF β-1 补充剂 0.5 mL 5 ng/mL 30 pg/mL rh 胰岛素 0.5 mL 5 µg/mL 抗坏血酸 0.5 mL 50 µg/mL 表 2. 如果使用成纤维细胞生长试剂盒 - 低血清 (ATCC® PCS-201-041 )，添加以下各组分的指定体积： 组分 体积 最终浓度 rh FGF basic 0.5 mL 5 ng/mL L-谷氨酰胺 18.75 mL 7.5 mM 抗坏血酸 0.5 mL 50 µg/mL 氢化可的松半琥珀酸酯 0.5 mL 1 µg/mL rh胰岛素 0.5 mL 5 µg/mL 胎牛血清 10.0 mL 2% 增殖不需要抗菌剂和酚红，但如果需要，可以添加。表 3 总结了添加到完整生长培养基中的每种可选成分的推荐体积。 表 3. 添加抗菌剂/抗真菌剂和酚红（可选） 成分 体积 最终浓度 庆大霉素-两性霉素 B 溶液 0.5 mL 庆大霉素：10 µg /mL 两性霉素 B：0.25 µg/mL 青霉素-链霉素-两性霉素 B 溶液 0.5 mL 青霉素：10 单位/mL 链霉素：10 µg/mL 两性霉素 B：25 ng/mL 酚红 0.5 mL 33 µM 盖紧完全生长的瓶子介质并轻轻旋转内容物以确保均匀的溶液。请勿用力摇晃，以免产生泡沫。给瓶子贴上标签并注明日期。完整的生长培养基应在 2°C 至 8°C 的黑暗条件下保存（不要冷冻）。在这些条件下储存时，完全生长培养基可稳定保存 30 天。
传代方法
规格
保存说明 -20°C 或更低,-70°C 用于长期储存
注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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