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Trypsin-EDTA for Primary Cells

  • 货号 : HZB391918
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ATCC PCS-999-003

  • 规格 : 100毫升
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Trypsin-EDTA for Primary Cells
别称
形态特征
特征特性 试剂
生长特性
主要用途 有关使用详情，请参阅每个原电池随附的产品说明书，或联系 ATCC 技术服务。
培养条件
培养基
使用方法 每种类型的细胞或细胞系都以独特的方式对原代细胞的胰蛋白酶-EDTA 做出反应。为了获得最佳结果，在解离过程中持续观察细胞以防止损坏。有关细胞特定信息，请参阅细胞或细胞系随附的产品表。使用前将 DPBS、原代细胞胰蛋白酶-EDTA 和胰蛋白酶中和溶液恢复至室温。在与细胞一起使用之前，将完全生长培养基加热至 37°C。对于每个烧瓶，小心地吸出用过的介质，不要干扰单层。如果细胞培养基含有血清，则应在添加原代细胞胰蛋白酶-EDTA 之前用 DPBS 冲洗每个烧瓶两次。每 25 cm2 使用 1 至 2 mL，将适当体积的胰蛋白酶-EDTA 溶液添加到每个烧瓶中（例如，每个 T-25 烧瓶将用 1 至 2 mL 胰蛋白酶-EDTA 解离）。轻轻摇动每个烧瓶，确保胰蛋白酶-EDTA 溶液完全覆盖细胞，然后吸出单层细胞中多余的液体；不要吸干。在显微镜下观察细胞。当细胞相互拉开并围成一圈时（通常在约 3 至 6 分钟内），从显微镜中取出培养瓶，并从多个侧面轻轻敲击培养瓶，以促进细胞从培养瓶中分离。不要过度胰蛋白酶消化，因为这会损坏细胞。一些强粘附细胞类型，例如角质形成细胞，可能需要更长的时间，并且可能需要在 37°C 下进行胰蛋白酶消化。某些细胞类型可能需要更剧烈的敲击。当大多数细胞似乎已分离时，快速向每个烧瓶中添加等体积的胰蛋白酶中和溶液。轻轻移液或旋转培养物以确保所有胰蛋白酶-EDTA 溶液已被中和。将解离的细胞转移到无菌离心管中并放在一边，同时处理培养瓶中剩余的细胞。将 3 至 5 mL DPBS 添加到组织培养瓶中，以收集可能留下的任何其他细胞。将细胞/DPBS 悬浮液转移至含有胰蛋白酶-EDTA 解离细胞的离心管中。根据需要重复步骤 8 和 9，直到从所有烧瓶中收集所有细胞。将细胞以 150 xg 离心 3 至 5 分钟。不要过度离心细胞，因为这可能会导致细胞损伤。离心后，细胞应形成干净的松散沉淀。吸出中和的解离溶液，并将细胞沉淀重悬于 2 至 8 mL 新鲜、预热的完全生长培养基中。计数细胞并以推荐的密度接种到新的培养瓶中。将新接种的烧瓶放入 37°C、5% CO2 培养箱中，培养至少 24 至 48 小时，然后再进一步处理细胞。
传代方法
规格 100毫升
保存说明 -20°C 或更低
注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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