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产品名称 | Dermal Cell Basal Medium |
别称 | |
形态特征 | |
特征特性 | 培养基 |
生长特性 | |
主要用途 | 真皮细胞基础培养基是一种无菌、不含酚红的液体组织培养基,旨在用作完整 ATCC Primary Cell Solutions™ 系统中的一个组件。该系统设计用于支持源自正常人表皮的细胞(例如角质形成细胞、黑素细胞)。真皮细胞基础培养基含有必需和非必需氨基酸、维生素、其他有机化合物、微量矿物质和无机盐。为了支持角质形成细胞(例如,原代表皮角质形成细胞、正常、人类新生儿包皮、ATCC PCS-200-010)的增殖和铺板效率,必须在真皮细胞基础培养基中添加角质形成细胞生长试剂盒(ATCC PCS-200-040) 。完全无血清(尽管不是无动物)培养基的配方可抑制成纤维细胞生长,低钙浓度(0.06 mM)会减慢分化。为了支持黑素细胞(例如,原代表皮黑素细胞、正常、人类新生儿、ATCC PCS-200-012 或原代表皮黑素细胞、正常、人类成人、ATCC PCS-200-013)的增殖和铺板效率,真皮细胞基础培养基必须补充黑色素细胞生长试剂盒 (ATCC PCS-200-041) 或成人黑色素细胞生长试剂盒 (ATCC PCS-200-042)。使用补充有适当生长试剂盒的真皮细胞基础培养基,无需使用饲养层、细胞外基质蛋白或其他基质即可支持角质形成细胞和黑素细胞的生长。可选培养基补充剂: 庆大霉素-两性霉素 B 溶液 (ATCC PCS-999-025) 青霉素-链霉素-两性霉素 B 溶液 (ATCC PCS-999-002) 酚红 (ATCC PCS-999-001) |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | 从冰箱中取出一套生长套件;确保所有组件的盖子均已拧紧。在将生长套件的组件添加到基础培养基中之前将其解冻。在添加到基础培养基之前,需要在 37°C 水浴中加热 L-谷氨酰胺组分并摇动以溶解任何沉淀物。从冷藏处获取一瓶真皮细胞基础培养基 (485 mL)。用 70% 乙醇喷洒所有生长套件组件小瓶和基础培养基瓶的外表面,以净化它们。使用无菌技术并在层流罩或生物安全柜中工作,将每个生长套件组件的体积(如表 1 或 2 所示)转移到基础培养基瓶中,每次转移时使用单独的无菌移液管表 1。如果使用角化细胞生长试剂盒 (ATCC® PCS-200-040),添加每种成分的指定体积: 成分 体积 最终浓度 牛垂体提取物 (BPE) 2.0 mL 0.4% rh TGF-a 0.5 mL 0.5 ng/mL L-谷氨酰胺 15.0 mL 6 mM 氢化可的松半琥珀酸酯 0.5 mL 100 ng/mL rh 胰岛素 0.5 mL 5 μg/mL 肾上腺素 0.5 mL 1.0 μM 载脂蛋白转铁蛋白 0.5 mL 5 μg/mL 表 2. 如果使用黑素细胞生长试剂盒 (ATCC® PCS-200-041) ),添加各组分的指定体积: 组分 体积 最终浓度 rh 胰岛素 0.5 mL 5 mg/mL 抗坏血酸 0.5 mL 50 mg/mL L-谷氨酰胺 15.0 mL 6 mM 肾上腺素 0.5 mL 1.0 mM 氯化钙 80 mL 0.2 mM M8 补充剂5 mL 专有配方 表 3. 如果使用成人黑素细胞生长试剂盒 (ATCC® PCS-200-042),请添加每种成分的指定体积: 成分 体积 最终浓度 rh 胰岛素 0.5 mL 5 mg/mL 抗坏血酸 0.5 mL 50 mg /mL L-谷氨酰胺 15.0 mL 6 mM 肾上腺素 0.5 mL 1.0 mM 氯化钙 840 mL 1.5 mM 肽生长因子 1.0 mL 专有配方 M8 补充剂 5 mL 专有配方 增殖不需要抗菌剂和酚红,但如果需要,可以添加。表 4 总结了添加到完整培养基中的每种可选成分的推荐体积。 表 4. 抗菌剂/抗生素和酚红(可选)的添加 成分 体积 最终浓度 庆大霉素-两性霉素 B 溶液 0.5 mL 庆大霉素:10 µg/ mL 两性霉素 B:0.25 µg/mL 青霉素-链霉素-两性霉素 B 溶液 0.5 mL 青霉素:10 单位/mL 链霉素:10 µg/mL 两性霉素 B:25 ng/mL 酚红 0.5 mL 33 µM 拧紧完全生长培养基瓶盖并轻轻旋转内容物以确保溶液均匀。请勿用力摇晃,以免产生泡沫。给瓶子贴上标签并注明日期。完整的生长培养基应在 2°C 至 8°C 的黑暗条件下保存(不要冷冻)。在这些条件下储存时,完整培养基可稳定保存 30 天。 |
传代方法 | |
规格 | 485 毫升 |
保存说明 | 2°C 至 8°C |
注意事项 | 更多信息请前往ATCC官网获取 |
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