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Serum-Free Cell Freezing Medium

  • 货号 : HZB391915
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ATCC 30-2600

  • 规格 : 20毫升
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Serum-Free Cell Freezing Medium
别称
形态特征
特征特性 试剂
生长特性
主要用途 ATCC® 无血清细胞冷冻培养基是一种无菌、即用型培养基，适用于贴壁和悬浮细胞培养物的冷冻保存。使用无血清冷冻培养基冷冻保存的细胞的活力水平和附着百分比（贴壁细胞）与保存在 DMSO 和 FBS 中的细胞相当。无血清细胞冷冻培养基可用于在补充血清的生长培养基中培养的细胞以及在无血清条件下生长的细胞。
培养条件
培养基
使用方法 细胞冷冻保存 当培养物活跃生长时冷冻保存细胞。如果在无血清条件下培养贴壁细胞，我们建议使用 ATCC® 30-2101 胰蛋白酶-EDTA 溶液 (1X) 和 ATCC® 30-2104 大豆胰蛋白酶抑制剂（50X 浓缩液）来分离细胞。使用标准的细胞特异性方法收获培养物以制备细胞悬浮液。将细胞以 125 xg 离心 5 至 10 分钟。不要过度离心细胞，因为这可能会导致细胞损伤。离心后，细胞应形成干净的松散沉淀。吸出培养基和（中和的）解离溶液（与贴壁细胞一起使用），并将细胞沉淀重悬于 2 至 8 mL 新鲜、预热的完全生长培养基中。计数细胞。再次以 125 xg 离心细胞 5 至 10 分钟。从储存中取出无血清细胞冷冻培养基并旋转混合。通过浸入或喷洒 70% 酒精来净化小瓶。吸出培养基并将细胞沉淀悬浮在无血清细胞冷冻培养基中，浓度为 3 x 106 至 5 x 106 个细胞/mL。将 1 mL 细胞悬浮液等分到每个标记的冷冻管中。以-1°C/min的速度逐渐冷冻细胞，直至温度达到-70°C至-80°C。细胞不应在 -80°C 下放置超过 24 至 48 小时。一旦达到-80°C，冷冻冻存管应转移至液氮气相中以进行长期储存。冷冻细胞的处理程序和培养起始 在与细胞一起使用之前，将完全生长培养基加热至 37°C。在 37°C 水浴中轻轻搅拌，解冻冷冻保存在无血清细胞冷冻培养基中的一小瓶细胞。为了减少污染的可能性，请将 O 形圈和盖子远离水。解冻应快速（约 90 秒）。在内容物完全解冻之前将小瓶从水浴中取出，并通过浸入或喷洒 70% 乙醇来净化。此后的所有操作均应在严格的无菌条件下进行。将小瓶内容物加上 5 mL 完全生长培养基转移至 15 mL 离心管中。使用额外的 1 mL 介质冲洗小瓶并将液体转移至 15 mL 管中。添加 4 mL 完整细胞生长培养基，使总体积达到 10 mL。以 125 xg 旋转细胞 5 分钟。吸出上清液并将沉淀重悬于 2 mL 完全生长培养基中。计数细胞；调整体积，使细胞以适当的接种密度铺板。
传代方法
规格 20毫升
保存说明 2°C 至 8°C
注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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