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Mycobacterium sp. bacteriophage D-34

  • 货号 : HZB371026
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ATCC 4243-B1

  • 规格 :
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Mycobacterium sp. bacteriophage D-34
别称 D-34
形态特征
特征特性 病毒,噬菌体,宿主:分枝杆菌129 [隆巴多-佩莱格里诺] (ATCC 4243)
生长特性 需氧,37℃
主要用途
培养条件
培养基
使用方法 遵循下面给出的噬菌体繁殖的一般程序。使用 ATCC® 4243™（与麻风病灶相关的分枝杆菌菌株 129）作为宿主。噬菌体繁殖的一般程序 从冻干或解冻的 LN2 小瓶中回收噬菌体： 在打开噬菌体样本之前，准备推荐宿主菌株的活跃生长的肉汤培养物。主机应处于早期日志阶段。将大约 1.0 mL 推荐的肉汤添加到冻干噬菌体小瓶中，将 0.5 mL 添加到液体冷冻管中。在培养箱中预热推荐培养基的板。用 2.5 mL 融化的 0.5% 琼脂（相同介质）覆盖表面，其中含有 0.5 mL 早期对数期宿主。软琼脂应保持在 43°C 至 45°C 直至准备倾倒。建议使用水浴。让覆盖层硬化。通过将 0.1 mL 噬菌体放入含有 0.9 mL 肉汤培养基的试管中，可以连续稀释再水合的噬菌体。根据需要重复任意数量的段落。许多菌株也可以在没有软琼脂覆盖的情况下进行滴定。将约 1.0 mL 的主机移至每个板的表面。倾斜板以确保覆盖整个表面后，吸出多余的液体。表面干燥后，像以前一样将噬菌体的各种稀释液滴到表面上。注：在板上发现噬菌体可以更容易地观察裂解情况。如果在倒入平板之前将噬菌体直接添加到软琼脂中，则可能很难看到模糊或微小的噬菌斑。耐药宿主细菌也可能掩盖菌斑形成。繁殖噬菌体：可以通过如上所述制备具有软琼脂/宿主覆盖物的平板并用大约 0.5 mL 浓缩噬菌体覆盖表面来繁殖噬菌体。或者，您可以将噬菌体直接添加到融化的琼脂/宿主中，然后倒在平板上。对于较大量，可以使用推荐的琼脂制备大尺寸 T 型烧瓶，并将约 12.0 mL 融化的软琼脂/宿主倒在表面上。然后让噬菌体在硬化的表面上运行。噬菌体也可以在如上所述倾倒之前直接添加到熔化的软琼脂中。当裂解区域出现生长后，将软琼脂从琼脂平板表面刮下。以约 1000 rpm 的速度离心 25 分钟，沉淀细胞碎片和琼脂。保存上清液。使上清液通过 0.22 µm Millipore 过滤器，并将滤液储存在 4-8°C 下。裂解物应在冷藏条件下长期保持活力。它们也可以在有或没有冷冻保护剂的情况下冷冻。如果可以的话，液氮储存是长期储存的最佳方法。大多数噬菌体也可以冷冻干燥。我们使用双倍浓度脱脂牛奶与滤液各半混合。注：大多数噬菌体也可采用肉汤繁殖方法。除非另有说明，ATCC 使用 MH Adams 噬菌体（Interscience Publishers, Inc.，纽约，1959）中描述的 Adams 琼脂覆盖方法进行常规噬菌体生产。
传代方法 ATCC 培养基 1395：含有 ADC 富集的 Middlebrook 7H9 肉汤 ATCC 培养基 0173：含有 OADC 的 Middlebrook 7H10 琼脂
规格
保存说明 2°C 至 8°C
注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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