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Erwinia amylovora bacteriophage PEa1 (h)

  • 货号 : HZB371035
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ATCC 29780-B1

  • 规格 :
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Erwinia amylovora bacteriophage PEa1 (h)
别称 PEa1 (h)
形态特征
特征特性 病毒,噬菌体,宿主:梨火欧文氏菌 110 (ATCC 29780)
生长特性 26℃
主要用途
培养条件
培养基
使用方法 1. 按照下面给出的噬菌体繁殖的一般程序。2.建议使用 ATCC 29780 解冻欧文氏菌 110 作为该噬菌体的繁殖宿主。噬菌体繁殖的一般程序从冻干或解冻的 LN2 小瓶中回收噬菌体：在打开噬菌体标本之前，准备推荐宿主菌株的活跃生长的肉汤培养物。主机年龄应为 18-24 小时。将大约 1.0 ml 推荐肉汤添加到冻干噬菌体小瓶中，将 0.5 ml 添加到液体冷冻瓶中。在培养箱中预热推荐培养基的板。用 2.5 毫升融化的 d 覆盖表面。 0.5% 琼脂（相同的培养基），其中含有一两滴 18-24 小时宿主。软琼脂应保持在 43 至 45oC 直至准备倾倒。建议使用水浴。让覆盖层硬化。通过将 0.1 ml 噬菌体放入含有 0.9 ml 肉汤培养基的试管中，可以连续稀释再水合的噬菌体。根据需要重复任意数量的段落。许多菌株也可以在没有软琼脂覆盖的情况下进行滴定。将约 1.0 ml 宿主移液至每个板的表面。倾斜板以确保覆盖整个表面后，吸出多余的液体。表面干燥后，像以前一样将噬菌体的各种稀释液滴到表面上。注：在板上发现噬菌体可以更容易地观察裂解情况。如果在倒入平板之前将噬菌体直接添加到软琼脂中，则可能很难看到模糊或微小的噬菌斑。耐药宿主细菌也可能掩盖噬菌斑的形成。 繁殖噬菌体：a．噬菌体可以通过制备具有上述软琼脂/宿主覆盖层的平板并用大约 0.5 ml 浓缩噬菌体覆盖表面来繁殖。或者，您可以将噬菌体直接添加到融化的琼脂/宿主中，然后倒在平板上。对于较大量，可以使用推荐的琼脂制备大尺寸 T 型烧瓶，并将约 12.0 毫升融化的软琼脂/基质倒在表面上。然后让噬菌体在硬化的表面上运行。噬菌体也可以在如上所述倾倒之前直接添加到融化的软琼脂中。孵育24小时后，从琼脂平板表面刮去软琼脂。以约 1000 rpm 的速度离心 25 分钟，沉淀细胞碎片和琼脂。保存上清液。使上清液通过 0.22 um Millipore 过滤器，并将滤液储存在 4-8oC 下。裂解物应在冷藏条件下长期保持活力。它们也可以在有或没有冷冻保护剂的情况下冷冻。如果可以的话，液氮储存是长期储存的最佳方法。大多数噬菌体也可以冷冻干燥。我们使用双倍浓度脱脂牛奶与滤液各半混合。注：大多数噬菌体也可采用肉汤繁殖方法。除非另有说明，ATCC 使用 MH Adams 噬菌体（Interscience Publishers, Inc.，纽约，1959）中描述的 Adams 琼脂覆盖方法进行常规噬菌体生产。
传代方法
规格
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注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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