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Campylobacter jejuni subsp. jejuni bacteriophage 5

  • 货号 : HZB371011
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ATCC 35922-B3

  • 规格 :
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Campylobacter jejuni subsp. jejuni bacteriophage 5
别称 14 [J2106]
形态特征
特征特性 病毒,噬菌体,分离基:家禽排泄物,宿主:BG 106 [1195-79] (ATCC 35922)
生长特性
主要用途
培养条件
培养基
使用方法 1. 按照下面给出的噬菌体繁殖的一般程序。2.使用 ATCC 35922 空肠弯曲杆菌亚种。空肠杆菌，菌株 BG 106 作为宿主。噬菌体繁殖的一般程序从冻干或冷冻小瓶中回收噬菌体：a．在打开噬菌体标本之前，准备推荐宿主菌株的活跃生长的肉汤培养物。主机应已存在 48 小时。将大约 1.0 ml 推荐肉汤添加到冻干噬菌体小瓶中，将 0.5 ml 添加到液体冷冻瓶中。在培养箱中预热推荐培养基的板。在表面覆盖 2.5 毫升融化的 0.6% 琼脂（相同的培养基），其中含有一两滴 48 小时宿主。软琼脂应保持在 43 至 45oC 直至准备倾倒。建议使用水浴。让覆盖层硬化。d．通过将 0.1 ml 噬菌体放入含有 0.9 ml 肉汤培养基的试管中，可以连续稀释再水合的噬菌体。根据需要重复任意数量的段落。许多菌株也可以在没有软琼脂覆盖的情况下进行滴定。将约 1.0 ml 宿主移液至每个板的表面。倾斜板以确保覆盖整个表面后，吸出多余的液体。表面干燥后，像以前一样将噬菌体的各种稀释液滴到表面上。注：在板上发现噬菌体可以更容易地观察裂解情况。如果在倒入平板之前将噬菌体直接添加到软琼脂中，则可能很难看到模糊或微小的噬菌斑。耐药宿主细菌也可能掩盖噬菌斑的形成。 繁殖噬菌体：a．噬菌体可以通过制备具有上述软琼脂/宿主覆盖层的平板并用大约 0.5 ml 浓缩噬菌体覆盖表面来繁殖。或者，您可以将噬菌体直接添加到融化的琼脂/宿主中，然后倒在平板上。对于较大量，可以使用推荐的琼脂制备大尺寸 T 型烧瓶，并将约 12.0 毫升融化的软琼脂/基质倒在表面上。然后让噬菌体在硬化的表面上运行。噬菌体也可以在如上所述倾倒之前直接添加到融化的软琼脂中。将板放置在带有弯曲杆菌气体发生器组或用于建立微需氧条件的其他适当方法的厌氧罐中。孵育 48 小时后，从琼脂平板表面刮去软琼脂。以约 1000 rpm 的速度离心 25 分钟，沉淀细胞碎片和琼脂。保存上清液。使上清液通过 0.22 um Millipore 过滤器，并将滤液储存在 4-8oC 下。裂解物应在冷藏条件下长期保持活力。它们也可以在有或没有冷冻保护剂的情况下冷冻。如果可以的话，液氮储存是长期储存的最佳方法。大多数噬菌体也可以冷冻干燥。我们使用双倍浓度脱脂牛奶与滤液各半混合。注：大多数噬菌体也可采用肉汤繁殖方法。除非另有说明，ATCC 使用 MH Adams 噬菌体（Interscience Publishers, Inc.，纽约，1959）中描述的 Adams 琼脂覆盖方法进行常规噬菌体生产。
传代方法
规格
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注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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