细胞到货后的处理及传代方法
来源：灰藻科技 浏览量：307 发布时间：2024-05-13 10:03:14
冻存细胞
产品验收
打开包装，检查箱内干冰是否充足，冻存管是否融化，如有问题请及时留存照片，并联系在线客服；
检查产品名称是否与说明书一致，然后仔细阅读产品说明书。
冻存细胞
处理方法
请及时将冻存管置于超低温冰箱内保存；
若长时间不使用必须在超低温冰箱内过夜后转移至液氮内保存。
冻存细胞处理流程
复苏过程
准备10ml离心管做好标记，加入预热好的9ml完全培养基；
将冻存管放入37℃水浴锅中轻轻摇晃，待细胞悬液完全溶解后，转移至超净台中；
用无菌吸管吸取细胞溶解液至装有9ml完全培养基内的离心管内，1000~1200转/分钟离心5分钟；
弃去离心管中的上清液，使用无菌吸管吸取1~2ml完全培养基，重悬细胞；
将细胞悬液加入到含有5~6ml完全培养基的T25瓶中，在显微镜下观察细胞状态并记录；
平放至培养箱中培养。
冻存细胞复苏
贴壁细胞
产品验收
打开包装，检查产品的内外包装是否有破损，如有问题请及时留存照片，并联系在线客服；
检查产品名称是否与说明书一致，然后仔细阅读产品说明书。
贴壁细胞
处理方法
酒精擦拭产品包装表面，放入培养箱内静置4小时；
取出细胞显微镜下观察，拍照记录细胞状态，若细胞密度达到80%可进行传代。
贴壁细胞处理流程
传代方法
将旧培养液移除，PBS清洗两遍后加入1~2ml胰酶；
显微镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时直接洗掉胰酶；
加入5~6ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落吹散；
将细胞悬液1：2比例分到新的T25瓶中，并添加适当的完全培养基，把T25瓶平放，细胞悬液打匀；
在显微镜下观察状态并记录，随后平放置培养箱中培养。
贴壁细胞传代
悬浮细胞
产品验收、处理方法见贴壁细胞
传代方法（离心法为例）
在无菌条件下，将T25培养瓶中的全部内容物转移到离心管中，做好标记，1000~1200rpm离心3~5分钟；
取出离心管，酒精擦拭表面，弃去上清液；
使用吸管在离心管内补加1~2ml培养液，吹匀；
将吸管内细胞悬液按1：2的比例分到新的含8ml培养基的T25瓶中；
显微镜下观察细胞状态及密度，拍照记录；
将培养瓶转移至培养箱中竖立培养。
悬浮细胞传代
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— 武汉市灰藻生物科技有限公司团队敬上
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2024.05.13