灰藻生物Logo

特别声明:本司产品仅用于科研,不用于临床诊断和治疗

X

技术支持Technical Support

联系我们CONTACT US

常用培养基的配制

来源:武汉市灰藻生物科技有限公司   浏览量:163   发布时间:2025-01-03 16:13:39

1.牛肉膏蛋白胨培养基(即营养肉汤培养基)

成分:

牛肉膏        3g

蛋白胨       10g

NaCl           5g

水               1000 mL

制法:

(1)于1000mL水中加人上述成分,加热溶解(须防止外溢);

(2)矫正pH至7.2~7.4;

(3)分装于适当容器内,0.1MPa灭菌20min,此为液体培养基;

(4)在液体培养基中加人15~20g琼脂(1.5%~2%),即为固体培养基;在液体培养基中加人5~7g琼脂(0.5%~0.7%),则为半固体培养基。

用途:液体和固体培养基供一般细菌培养用,并可作无糖基础培养基;半固态培养基用于保存一般菌种,并可用于观察细菌的动力。

2.高氏合成一号琼脂培养基(高氏(Gause)1号培养基)

成分:

可溶性淀粉                                 20g

KNO3                                          1 g

NaCl                                           0.5 g

K2HPO4                                      0.5 g

MgSO4·7H2O                             0.5 g

FeSO4·7H2O                              0.01 g

琼脂                                            20 g

水                                               1000 mL

PH7.2~7.4

制法:

(1)先用少量蒸馏水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,边搅拌边加人其他成分,加热溶化后,补足水分至1000mL;

(2)调pH至7.2~7.4,分装于适当容器中,0.1 MPa灭菌 20 min。

用途:供培养放线菌用。

3.马丁氏(Martin)琼脂培养基

成分:

葡萄糖                           10g

蛋白胨                            5g

KH2PO4                          1 g

MgSO4·7H2O                  0.5 g

琼脂                                20g

蒸馏水                            1000mL

0.1%孟加拉红水溶液       3.3mL

1%链霉素                         3 mL

PH自然

制法:

于1000mL蒸馏水中依次加入除链霉素外的各成分,加热溶解,pH自然,0.06 MPa灭菌 30min;

(2)待冷却至50℃,(临用前)加人链霉素,每100mL培养基中加人1%链霉素0.3mL,充分混匀后倒平板,凝固后置阴暗处或冰箱贮存备用。

用途:供分离真菌用,培养基中的孟加拉红和链霉素可抑制细菌和放线菌的生长,对真菌无抑制作用。

4.查氏(Czapek)培养基(蔗糖硝酸钠培养基)

成分:

蔗糖                           30 g

NaNO3                       2 g

KH2PO4                     1 g

MgSO4·7H2O            0.5 g

KCl                            0.5 g

FeSO4·7H2O             0.01 g

琼脂                           20g

蒸馏水                       1000mL

PH自然

制法:

(1)将上述成分依次溶化在少量蒸馏水中,待各成分完全溶化后,补足水分到所需体积(不必矫正pH);

(2)将培养基分装于适当的容器中,0.05MPa灭菌20min。

用途:供培养霉菌用。

5.YPD 培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Medium,YPD或YEPD,酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的为酵母膏胨葡萄糖琼脂培养基)

成分:

酵母膏                          10g

蛋白胨                          20g

葡萄糖                           20g

琼脂                              20g

水                                 1000 mL

PH自然

制法:

(1)上述成分混合后加热溶解,不用矫正pH,分装适当容器;

(2)0.06 MPa灭菌 30 min。

用途:供酵母菌培养用。

6.马铃薯培养基(PotatoDextrose Agar Medium,PDA,马铃薯葡萄糖琼脂培养基)

成分:

马铃薯                           200g

琼脂                              15~20 g

葡萄糖(或蔗糖)              20g(酵母菌用葡萄糖,霉菌用蔗糖)

pH自然

制法:

(1)马铃薯去皮,切成小块煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,制成 20%的马铃薯浸汁;

(2)加糖及琼脂,溶化后补水至1000mL;

(3)0.1 MPa 灭菌 20 min。

用途:培养霉菌、真菌(酵母菌)用。

7.豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)培养基

成分:

黄豆芽                          100g

葡萄糖(或蔗糖)              50g

蒸馏水                          1000 ml

PH(根据培养菌的种类而定)

制法:

(1)称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加人水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤用水补足至原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化;

(2)将其分装于适当的容器中,0.1MPa,灭菌20min;

(3)细菌培养:10%豆芽汁200m,葡萄糖(或蔗糖)50g,水800mL,pH7.2~7.4;

(4)霉菌或酵母菌培养:10%豆芽汁200mL,糖50g(霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖),水 800 mL,pH自然。

用途:供细菌、酵母菌,霉菌培养用,也可供糖类发酵用。

8.淀粉培养基

成分:

蛋白胨                          10g

牛肉膏                          5g

可溶性淀粉                   2g

NaCl                             5g

琼脂                             15~20g

蒸馏水                          1000mL

pH                                 7.2

制法:

(1)取少量水将淀粉调成糊状,再加人已溶化好的培养基中,定容到1000mL;

(2)调节pH至7.2,分装于适当的容器中,0.1 MPa,灭菌 20min。

用途:供淀粉水解试验用。

9.明胶培养基

成分:

牛肉膏蛋白胨液        100mL

明胶                          12 g

pH                              7.2~7.4

制法:

在水浴锅中将上述成分加热溶化,调节pH为7.2~7.4,分装于试管,培养基高度约4~5 cm;0.06 MPa、灭菌 30 min。

用途:供明胶水解试验用。

10.蛋白胨水培养基

成分:

蛋白胨(或胰蛋白胨10g)       20g

NaCl                                    5 g

蒸馏水                                 1000 mL

pH                                       7.4~7.6

制法:

(1)将上述成分混合于蒸馏水中加热溶解,调节pH为7.4~7.6;

(2)分装于试管内,每管1~1.5 mL,0.1 MPa,灭菌 30 min。

用途:供靛基质(吲哚)试验用。

11.葡萄糖蛋白胨水

成分:

蛋白胨                          5g

葡萄糖                          5g

K2HPO4                        2 g

蒸馏水                          1000mL

pH                                7. 2

制法:

(1)将上述成分溶于1000 mL水中,加热、溶解,调 pH 为 7.2;

(2)分装于试管内,每管10mL,0.06 MPa灭菌30min。

用途:供甲基红试验、VP试验用。

12.糖、醇发酵培养基

成分:

蛋白胨水或肉汤蛋白胨培养基(pH7.4~7.6)   100mL

所需糖或醇类物质                                         1g

1.6%溴甲酚紫乙醇溶液                                  0.1ml

制法:

(1)取蛋白胨水培养基(pH7.4~7.6)100mL,加入糖或醇类物质1g,加热溶解后再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液0.1mL,混匀;

(2)分装于试管内,每管约5mL,管内装倒置的杜氏小管(管内充满培养液),贴上各类糖或醇类标签备用;

(3)0.06MPa火菌30min。

用途:观察细菌对糖、醇发酵能力,用于鉴定细菌。

13.柠檬酸铁铵培养基

成分:

蛋白胨                        20g

NaCl                           5g

柠檬酸铁铵                0.5g

硫代硫酸钠                0.5g

琼脂                          5~8g

蒸馏水                     1000mL

pH                            7.2

制法:

(1)先用水将琼脂和蛋白胨溶化,冷却至60℃左右加入其他成分,溶化后补足水量;

(2)调节pH为7.2后分装试管,0.1MPa20min 灭菌后备用。

用途:用于硫化氢试验,观察细菌产生硫化氢情况,用于鉴定细菌

14.柠檬酸盐培养基

成分:

NaCl                           5 g

硫酸镁                        0.2g

NH4H2PO4                 1 g

K2HPO4                     1 g

柠檬酸钠                     2g

琼脂                           20g

蒸馏水                       1000mL

pH                              6.8

1%溴麝香草酚蓝乙醇溶液10mL

制法:

(1)将上述各成分(溴麝香草酚蓝除外)加热溶解,调节pH至6.8;

(2)加人溴麝香草酚蓝,混匀,分装试管,每管约5mL;

(3)0.1 MPa 灭菌 20 min 后制成斜面备用;

(4)注意配制时控制好pH,不要过碱,以黄绿色为准。

用途:用于柠檬酸盐利用试验。

15.硝酸盐还原试验培养基

成分:

蛋白胨                     10g

NaCl                        5g

硝酸钾                    1g

蒸馏水                    1000mL

pH                          7.4

制法:

(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至7.4,分装试管:

(2)0.1 MPa高压灭菌 20 min。

用途:硝酸盐还原试验。

16.酪素培养基

成分:

KH2PO4                            0.036g

Na2HPO4·7H2O               1.07g

NaCl                                 0.16 g

MgSO4·7H2O                   1.07g

CaCl2·2H2O                      0.002 g

ZnCl2                                 0.014 g

酪素                                   4g

酪素水解氨基酸                0.05g

琼脂                                  20g

蒸馏水                              1000 mL

pH                                     7.0~7.2

制法:

(1)先将酪素放人烧杯中,加人0.2mol/LNaOH约2m,将酪素溶解后加人适量温水,过滤,备用;

(2)将磷酸盐放入一烧杯中,加入适量蒸馏水溶解后,依次加人其他无机盐和酪素及酪素水解氨基酸,再加人水定容至1000mL;

(3)调节pH至7.0~7.2后、加人琼脂,0.06 MPa灭菌 30 min;

用途:检查细菌是否具有分解酪素的特性。

17.合成培养基

成分:

磷酸铵                          1g

KCl                                0.2 g

MgSO4·7H2O                0.2 g

豆芽汁                          10mL

琼脂                              20 g

蒸馏水                          1000 mL

pH                                7.0

0.04%的溴甲酚紫        12ml

制法:

将上述成分加人1000mL蒸馏水中,加热溶化,调节pH至7.0后,1000mL合成培养基加人12mL0.04%的溴甲酚紫(pH5.2~6.8,颜色由黄色变紫色)作为指示剂,然后分装至合适的容器,0.1MPa、121℃灭菌20min,备用。

用途:用于筛选营养缺陷型的细菌。

18.麦芽汁琼脂培养基

制法:

(1)稀释去除啤酒花的麦芽汁至浓度为10~15波林(糖浓度单位)1000mL;

(2)按2%的比例将琼脂加进上述麦芽汁中,加热溶解,调节pH至6.4,后将培养基分装至适当容器中;

(3)0.06 MPa 灭菌 30 min。

用途:用于培养酵母和乳酸杆菌培养。

19.伊红美蓝培养基(EMB培养基)

成分:

蛋白胨                              10g

乳糖                                 10g

K2HPO4                           2g

琼脂                                 15~20 g

蒸馏水                             1000mL

20/L伊红水溶液(无菌)     20mL

5克/升美蓝水溶液(无菌) 13ml

制法:

(1)将蛋白胨、K2HPO4、琼脂加热溶解于蒸馏水中,调节pH至7.2,加入乳糖混匀后分装;

(2)115 ℃高压灭菌20 min;

(3)临用时加热融化琼脂,冷却至50~55℃,加入伊红及美蓝溶液(伊红在培养基中终浓度为0.4‰,美蓝在培养基中终浓度为0.065‰),混均倾注平皿,凝固备用。

用途:分离肠道致病菌。

20.无氮基本培养基

成分:

葡萄糖                         10g

KH2PO4                       0.2g

NaCl                            0.2 g

MgSO4·7H2O              0.2 g

CaSO4·2H2O              0.2 g

CaCO3                         5 g

蒸馏水                        1000 mL

pH                                7.0~7.2

制法:将上述成分溶于水中,调pH至7.0,0.06MPa灭菌30min。

用途:测定细菌生长谱:自生固氮菌、钾细菌的分离培养。

21.油脂培养基

成分:

蛋白胨                       10g

牛肉膏                       5g

NaCl                          5 g

香油或花生油            10g

琼脂                           20 g

蒸馏水                       1000mL

pH                              7. 2

1.6%中性红水溶液     1mL

制法:

(1)将油(不可使用变质的油)和琼脂溶解于水中先加热,待琼脂溶解后调H至7.2,再加人中性红;

(2)高压灭菌0.1MPa灭菌20min,待冷却至60℃左右倾注平板,分装时需不断搅拌,使油均匀分布于培养基中。

用途:细菌水解油脂试验用。

22.麦氏(Meclary)琼脂培养基(醋酸钠培养基)

成分:

葡萄糖                       1g

氯化钾                       1.8g

酵母浸膏                    2.5g

醋酸钠                        8.2g

琼脂                            15~20 g

pH                                6. 4

水                                 1000 mL

制法:

(1)上述成分混合后,加热溶解,分装至适当容器;

(2)高压灭菌0.06 MPa 30 min。

用途:酵母菌培养。

23.RCM 培养基(强化梭菌培养基)

成分:

酵母膏                    3g

牛肉膏                    10g

可溶性淀粉             1g

蛋白胨                    10g

葡萄糖                    5g

NaAc                      3 g

NaCl                       3 g

蒸馏水                     1000 mL

刃天青                     3 mg/L

半胱氨酸盐酸盐       0.5g

pH                           8.5

制法:

(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至8.5;

(2)加刃天青3mg/L,分装至适当容器;

(3)0.1 MPa灭菌 30 min。

用途:用于厌氧菌培养。

24.TYA 培养基

成分:

葡萄糖                     40g

牛肉膏                     2g

酵母膏                     2g

胰蛋白胨                  6g

醋酸铵                     3g

KH2PO4                   0.5 g

MgSO4·7H2O           0.2 g

FeSO4·7H2O            0.01 g

蒸馏水                      1000 mL

pH                             6. 5

制法:

(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至6.5,分装至适当容器;

(2)0.1 MPa灭菌 30 min。

用途:用于厌氧菌培养。

25.玉米醪培养基

成分:

玉米粉                   65 g

自来水                   1000mL

制法:

(1)将玉米粉加人水中调匀,煮10min成糊状,pH 自然;

(2)0.1 MPa灭菌 30 min。

用途:用于厌氧菌培养

26.中性红培养基

成分:

葡萄糖                   40g

胰蛋白胨                6g

酵母膏                    2g

牛肉膏                   2g

酷酸铵                   3g

KH2PO4                 5 g

中性红                   0.2g

MgSO4·7H2O        0.2 g

FeSO4·7H2O        0.01 g

蒸馏水                  1000 mL

pH6.2

制法:

(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至6.2,分装于适当容器;

(2)0.1 MPa灭菌 20 min。

用途:用于厌氧菌培养。

27.碳酸钙明胶麦芽汁培养基

成分:

麦芽汁(6波美)    1000mL

蒸馏水                1000 mL

CaCO3               10 g

明胶                   10 g

pH                      6.8

(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至6.8,分装于适当容器;

(2)0.1 MPa灭菌 20 min。

用途:用于厌氧菌培养。

28.BCG 牛乳培养基

成分:

A溶液:脱脂乳粉                  100g

蒸馏水                                500 mL

1.6%溴甲酚绿(B.C.G)

乙醇溶液                          1mL

B溶液:酵母膏                   10g

蒸馏水                              500 mL

琼脂                                 20 g

pH                                    6.8

制法:A、B液分开灭菌。

(1)A溶液:80 ℃灭菌20 min;

(2)B溶液:0.1MPa灭菌20min;

(3)无菌操作趁热将A、B溶液混合均匀后倒平板;

用途:用于乳酸菌发酵。

29.乳酸菌培养基

成分:

牛肉膏                  5g

酵母膏                  5g

蛋白胨                  10g

葡萄糖                  10g

乳糖                       5g

NaCl                      5 g

蒸馏水                   1000 mL

pH                        6.8

制法:

(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至6.8,分装于适当容器;

(2)0.1 MPa 灭菌 20 min。

用途:用于乳酸发酵。

30.酒精发酵培养基

蔗糖                   10 g

MgSO4·7H2O    0.5g

NH4NO3            0.5 g

20%豆芽汁       2mL

KH2PO4           0.5g

蒸馏水             100ml

PH自然

制法:

(1)上述成分混合后,加热溶解,pH自然,分装于适当容器

(2)0.1 MPa灭菌 20 min。

用途:用于酒精发酵。

31.基本培养基

成分:

Na2HPO4·7H2O      1g

MgSO4·7H2O          0.2g

葡萄糖                      5g

NaCl                        5 g

K2HPO4                   1g

蒸馏水                    1000 mL

pH                          7.0

制法:

(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至7.0,分装于适当容器;

(2)0.1 MPa灭菌 30 min。

用途:用于筛选营养缺陷型细菌。

32.丙二酸盐培养基(缩水苹果酸钠培养基)

成分:

丙二酸钠          0.3g

酵母浸膏          0.1g

NaCl                0.2 g

硫酸铵             0.2g

K2HPO4           0.06g

磷酸二氢钾      0.04 g

蒸馏水            100mL

pH                  6.8

0.2%溴麝香酚兰乙醇1.25 mL

制法:

(1)将上述各成分(溴麝香草酚蓝除外)加入溶解,调节pH至6.8;

(2)加人溴麝香草酚蓝、混匀,分装试管,每管约5mL;

(3)0.1 MPa灭菌 30 min。

用途:测定细菌能否利用丙二酸盐为碳源。

33.复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)

成分:

蛋白胨                10g

牛肉膏                 5g

酵母浸膏             5g

琼脂                    20 g

乳糖                   10g

K2HPO4            0.5g

无水亚硫酸钠    5g

5%碱性复红乙醇溶液20mL

蒸馏水              1000mL

制作:

(1)将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加人900mL水中,加热溶解;

(2)再加人K2HPO4,溶解后补水至1000mL,调节pH至7.2~7.4,然后加人乳糖混匀溶解;

(3)115℃湿热灭菌20 min;

(4)再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中,用少许无菌水使其溶解,在水浴中煮沸10min后,立即滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色转变为淡粉红色为止;

(5)将此混合液全部加入上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中,混匀后立即倒平板,待凝固后存放冰箱备用,若颜色由淡红变为深红,则不能再用。

用途:用于水体中大肠菌群测定。

34.LB(Luria-Bertani)培养基

成分:

胰蛋白胨           10g

NaCl                  5g

酵母膏              10g

蒸馏水              1000mL

pH                     7.2

制法:

(1)上述成分混合后,加热溶解,pH调至7.2,分装于适当容器

(2)0.1MPa灭菌20min。

用途:细菌培养。

35.LAB 培养基

成分:

牛肉膏               10g

酵母膏               10g

乳糖                   20 g

吐温-80             1 mL

CaCO3                  10 g

K2HPO4             2g

琼脂                  10g

蒸馏水              1000mL

pH                     6.6

制法:121 ℃灭菌 20 min。

用途:用于乳酸菌活菌计数。

36.MRS 培养基

成分:

蛋白胨             10g

牛肉膏             10g

酵母膏              5g

葡萄糖              20g

吐温-80            1mL

K2HPO4             2g

三水乙酸钠        5g

柠檬酸三铵       2g

MgSO4·7H2O   0.58g

MnSO4·4H2O   0.25g

琼脂                 15g

蒸馏水             1000mL

pH                   6.2~6.6

制法:121 ℃灭菌 20 min。

用途:用于乳酸菌活菌分离、培养及计数

37.乳糖蛋白胨液体培养基

成分:

蛋白胨                     10g

牛肉膏                      3g

乳糖                          5g

NaCl                         5 g

蒸馏水                      1000 mL

pH                            7.2~74

1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL

制法:

(1)将牛肉膏、蛋白胨、乳糖、氯化钠各成分溶解于1000mL蒸馏水中,调节pH为7.2~7.4

(2)再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1m,充分混匀分装于试管,并放入倒置杜氏小管

(3)115℃高压灭菌20min,贮存于冷暗处备用,

用途:用于多管发酵法水中总大肠菌群的测定

38.二倍(三倍)浓缩乳糖蛋白胨液体培养基

将乳糖蛋白液体胨培养基中各成分除蒸馏水之外均扩大为2倍(或3倍)用量后加入蒸馏水中,制法同乳糖蛋白胨液体培养基。

充分混匀分装于试管,并放入倒置杜氏小管,115℃高压蒸汽灭菌20min。

用途:用于多管发酵法水中总大肠菌群的测定

参考文献

孙智杰, 刘芳. 基础微生物学实验指导. 北京理工大学出版社.

相关菌株

HZB875009

MRS琼脂培养基

敬请关注“灰藻视界”,共筑健康未来!
— 武汉市灰藻生物科技有限公司团队敬上

灰藻生物:我们期待着与客户共同成长,共创生命科学的美好未来!

更新日期:2025-01-03

#创作团队

编制人:木木