常用培养基的配制
来源:武汉市灰藻生物科技有限公司 浏览量:163 发布时间:2025-01-03 16:13:39
1.牛肉膏蛋白胨培养基(即营养肉汤培养基)
成分:
牛肉膏 3g
蛋白胨 10g
NaCl 5g
水 1000 mL
制法:
(1)于1000mL水中加人上述成分,加热溶解(须防止外溢);
(2)矫正pH至7.2~7.4;
(3)分装于适当容器内,0.1MPa灭菌20min,此为液体培养基;
(4)在液体培养基中加人15~20g琼脂(1.5%~2%),即为固体培养基;在液体培养基中加人5~7g琼脂(0.5%~0.7%),则为半固体培养基。
用途:液体和固体培养基供一般细菌培养用,并可作无糖基础培养基;半固态培养基用于保存一般菌种,并可用于观察细菌的动力。
2.高氏合成一号琼脂培养基(高氏(Gause)1号培养基)
成分:
可溶性淀粉 20g
KNO3 1 g
NaCl 0.5 g
K2HPO4 0.5 g
MgSO4·7H2O 0.5 g
FeSO4·7H2O 0.01 g
琼脂 20 g
水 1000 mL
PH7.2~7.4
制法:
(1)先用少量蒸馏水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,边搅拌边加人其他成分,加热溶化后,补足水分至1000mL;
(2)调pH至7.2~7.4,分装于适当容器中,0.1 MPa灭菌 20 min。
用途:供培养放线菌用。
3.马丁氏(Martin)琼脂培养基
成分:
葡萄糖 10g
蛋白胨 5g
KH2PO4 1 g
MgSO4·7H2O 0.5 g
琼脂 20g
蒸馏水 1000mL
0.1%孟加拉红水溶液 3.3mL
1%链霉素 3 mL
PH自然
制法:
于1000mL蒸馏水中依次加入除链霉素外的各成分,加热溶解,pH自然,0.06 MPa灭菌 30min;
(2)待冷却至50℃,(临用前)加人链霉素,每100mL培养基中加人1%链霉素0.3mL,充分混匀后倒平板,凝固后置阴暗处或冰箱贮存备用。
用途:供分离真菌用,培养基中的孟加拉红和链霉素可抑制细菌和放线菌的生长,对真菌无抑制作用。
4.查氏(Czapek)培养基(蔗糖硝酸钠培养基)
成分:
蔗糖 30 g
NaNO3 2 g
KH2PO4 1 g
MgSO4·7H2O 0.5 g
KCl 0.5 g
FeSO4·7H2O 0.01 g
琼脂 20g
蒸馏水 1000mL
PH自然
制法:
(1)将上述成分依次溶化在少量蒸馏水中,待各成分完全溶化后,补足水分到所需体积(不必矫正pH);
(2)将培养基分装于适当的容器中,0.05MPa灭菌20min。
用途:供培养霉菌用。
5.YPD 培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Medium,YPD或YEPD,酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的为酵母膏胨葡萄糖琼脂培养基)
成分:
酵母膏 10g
蛋白胨 20g
葡萄糖 20g
琼脂 20g
水 1000 mL
PH自然
制法:
(1)上述成分混合后加热溶解,不用矫正pH,分装适当容器;
(2)0.06 MPa灭菌 30 min。
用途:供酵母菌培养用。
6.马铃薯培养基(PotatoDextrose Agar Medium,PDA,马铃薯葡萄糖琼脂培养基)
成分:
马铃薯 200g
琼脂 15~20 g
葡萄糖(或蔗糖) 20g(酵母菌用葡萄糖,霉菌用蔗糖)
pH自然
制法:
(1)马铃薯去皮,切成小块煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,制成 20%的马铃薯浸汁;
(2)加糖及琼脂,溶化后补水至1000mL;
(3)0.1 MPa 灭菌 20 min。
用途:培养霉菌、真菌(酵母菌)用。
7.豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)培养基
成分:
黄豆芽 100g
葡萄糖(或蔗糖) 50g
蒸馏水 1000 ml
PH(根据培养菌的种类而定)
制法:
(1)称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加人水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤用水补足至原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化;
(2)将其分装于适当的容器中,0.1MPa,灭菌20min;
(3)细菌培养:10%豆芽汁200m,葡萄糖(或蔗糖)50g,水800mL,pH7.2~7.4;
(4)霉菌或酵母菌培养:10%豆芽汁200mL,糖50g(霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖),水 800 mL,pH自然。
用途:供细菌、酵母菌,霉菌培养用,也可供糖类发酵用。
8.淀粉培养基
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 5g
可溶性淀粉 2g
NaCl 5g
琼脂 15~20g
蒸馏水 1000mL
pH 7.2
制法:
(1)取少量水将淀粉调成糊状,再加人已溶化好的培养基中,定容到1000mL;
(2)调节pH至7.2,分装于适当的容器中,0.1 MPa,灭菌 20min。
用途:供淀粉水解试验用。
9.明胶培养基
成分:
牛肉膏蛋白胨液 100mL
明胶 12 g
pH 7.2~7.4
制法:
在水浴锅中将上述成分加热溶化,调节pH为7.2~7.4,分装于试管,培养基高度约4~5 cm;0.06 MPa、灭菌 30 min。
用途:供明胶水解试验用。
10.蛋白胨水培养基
成分:
蛋白胨(或胰蛋白胨10g) 20g
NaCl 5 g
蒸馏水 1000 mL
pH 7.4~7.6
制法:
(1)将上述成分混合于蒸馏水中加热溶解,调节pH为7.4~7.6;
(2)分装于试管内,每管1~1.5 mL,0.1 MPa,灭菌 30 min。
用途:供靛基质(吲哚)试验用。
11.葡萄糖蛋白胨水
成分:
蛋白胨 5g
葡萄糖 5g
K2HPO4 2 g
蒸馏水 1000mL
pH 7. 2
制法:
(1)将上述成分溶于1000 mL水中,加热、溶解,调 pH 为 7.2;
(2)分装于试管内,每管10mL,0.06 MPa灭菌30min。
用途:供甲基红试验、VP试验用。
12.糖、醇发酵培养基
成分:
蛋白胨水或肉汤蛋白胨培养基(pH7.4~7.6) 100mL
所需糖或醇类物质 1g
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 0.1ml
制法:
(1)取蛋白胨水培养基(pH7.4~7.6)100mL,加入糖或醇类物质1g,加热溶解后再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液0.1mL,混匀;
(2)分装于试管内,每管约5mL,管内装倒置的杜氏小管(管内充满培养液),贴上各类糖或醇类标签备用;
(3)0.06MPa火菌30min。
用途:观察细菌对糖、醇发酵能力,用于鉴定细菌。
13.柠檬酸铁铵培养基
成分:
蛋白胨 20g
NaCl 5g
柠檬酸铁铵 0.5g
硫代硫酸钠 0.5g
琼脂 5~8g
蒸馏水 1000mL
pH 7.2
制法:
(1)先用水将琼脂和蛋白胨溶化,冷却至60℃左右加入其他成分,溶化后补足水量;
(2)调节pH为7.2后分装试管,0.1MPa20min 灭菌后备用。
用途:用于硫化氢试验,观察细菌产生硫化氢情况,用于鉴定细菌
14.柠檬酸盐培养基
成分:
NaCl 5 g
硫酸镁 0.2g
NH4H2PO4 1 g
K2HPO4 1 g
柠檬酸钠 2g
琼脂 20g
蒸馏水 1000mL
pH 6.8
1%溴麝香草酚蓝乙醇溶液10mL
制法:
(1)将上述各成分(溴麝香草酚蓝除外)加热溶解,调节pH至6.8;
(2)加人溴麝香草酚蓝,混匀,分装试管,每管约5mL;
(3)0.1 MPa 灭菌 20 min 后制成斜面备用;
(4)注意配制时控制好pH,不要过碱,以黄绿色为准。
用途:用于柠檬酸盐利用试验。
15.硝酸盐还原试验培养基
成分:
蛋白胨 10g
NaCl 5g
硝酸钾 1g
蒸馏水 1000mL
pH 7.4
制法:
(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至7.4,分装试管:
(2)0.1 MPa高压灭菌 20 min。
用途:硝酸盐还原试验。
16.酪素培养基
成分:
KH2PO4 0.036g
Na2HPO4·7H2O 1.07g
NaCl 0.16 g
MgSO4·7H2O 1.07g
CaCl2·2H2O 0.002 g
ZnCl2 0.014 g
酪素 4g
酪素水解氨基酸 0.05g
琼脂 20g
蒸馏水 1000 mL
pH 7.0~7.2
制法:
(1)先将酪素放人烧杯中,加人0.2mol/LNaOH约2m,将酪素溶解后加人适量温水,过滤,备用;
(2)将磷酸盐放入一烧杯中,加入适量蒸馏水溶解后,依次加人其他无机盐和酪素及酪素水解氨基酸,再加人水定容至1000mL;
(3)调节pH至7.0~7.2后、加人琼脂,0.06 MPa灭菌 30 min;
用途:检查细菌是否具有分解酪素的特性。
17.合成培养基
成分:
磷酸铵 1g
KCl 0.2 g
MgSO4·7H2O 0.2 g
豆芽汁 10mL
琼脂 20 g
蒸馏水 1000 mL
pH 7.0
0.04%的溴甲酚紫 12ml
制法:
将上述成分加人1000mL蒸馏水中,加热溶化,调节pH至7.0后,1000mL合成培养基加人12mL0.04%的溴甲酚紫(pH5.2~6.8,颜色由黄色变紫色)作为指示剂,然后分装至合适的容器,0.1MPa、121℃灭菌20min,备用。
用途:用于筛选营养缺陷型的细菌。
18.麦芽汁琼脂培养基
制法:
(1)稀释去除啤酒花的麦芽汁至浓度为10~15波林(糖浓度单位)1000mL;
(2)按2%的比例将琼脂加进上述麦芽汁中,加热溶解,调节pH至6.4,后将培养基分装至适当容器中;
(3)0.06 MPa 灭菌 30 min。
用途:用于培养酵母和乳酸杆菌培养。
19.伊红美蓝培养基(EMB培养基)
成分:
蛋白胨 10g
乳糖 10g
K2HPO4 2g
琼脂 15~20 g
蒸馏水 1000mL
20/L伊红水溶液(无菌) 20mL
5克/升美蓝水溶液(无菌) 13ml
制法:
(1)将蛋白胨、K2HPO4、琼脂加热溶解于蒸馏水中,调节pH至7.2,加入乳糖混匀后分装;
(2)115 ℃高压灭菌20 min;
(3)临用时加热融化琼脂,冷却至50~55℃,加入伊红及美蓝溶液(伊红在培养基中终浓度为0.4‰,美蓝在培养基中终浓度为0.065‰),混均倾注平皿,凝固备用。
用途:分离肠道致病菌。
20.无氮基本培养基
成分:
葡萄糖 10g
KH2PO4 0.2g
NaCl 0.2 g
MgSO4·7H2O 0.2 g
CaSO4·2H2O 0.2 g
CaCO3 5 g
蒸馏水 1000 mL
pH 7.0~7.2
制法:将上述成分溶于水中,调pH至7.0,0.06MPa灭菌30min。
用途:测定细菌生长谱:自生固氮菌、钾细菌的分离培养。
21.油脂培养基
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 5g
NaCl 5 g
香油或花生油 10g
琼脂 20 g
蒸馏水 1000mL
pH 7. 2
1.6%中性红水溶液 1mL
制法:
(1)将油(不可使用变质的油)和琼脂溶解于水中先加热,待琼脂溶解后调H至7.2,再加人中性红;
(2)高压灭菌0.1MPa灭菌20min,待冷却至60℃左右倾注平板,分装时需不断搅拌,使油均匀分布于培养基中。
用途:细菌水解油脂试验用。
22.麦氏(Meclary)琼脂培养基(醋酸钠培养基)
成分:
葡萄糖 1g
氯化钾 1.8g
酵母浸膏 2.5g
醋酸钠 8.2g
琼脂 15~20 g
pH 6. 4
水 1000 mL
制法:
(1)上述成分混合后,加热溶解,分装至适当容器;
(2)高压灭菌0.06 MPa 30 min。
用途:酵母菌培养。
23.RCM 培养基(强化梭菌培养基)
成分:
酵母膏 3g
牛肉膏 10g
可溶性淀粉 1g
蛋白胨 10g
葡萄糖 5g
NaAc 3 g
NaCl 3 g
蒸馏水 1000 mL
刃天青 3 mg/L
半胱氨酸盐酸盐 0.5g
pH 8.5
制法:
(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至8.5;
(2)加刃天青3mg/L,分装至适当容器;
(3)0.1 MPa灭菌 30 min。
用途:用于厌氧菌培养。
24.TYA 培养基
成分:
葡萄糖 40g
牛肉膏 2g
酵母膏 2g
胰蛋白胨 6g
醋酸铵 3g
KH2PO4 0.5 g
MgSO4·7H2O 0.2 g
FeSO4·7H2O 0.01 g
蒸馏水 1000 mL
pH 6. 5
制法:
(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至6.5,分装至适当容器;
(2)0.1 MPa灭菌 30 min。
用途:用于厌氧菌培养。
25.玉米醪培养基
成分:
玉米粉 65 g
自来水 1000mL
制法:
(1)将玉米粉加人水中调匀,煮10min成糊状,pH 自然;
(2)0.1 MPa灭菌 30 min。
用途:用于厌氧菌培养
26.中性红培养基
成分:
葡萄糖 40g
胰蛋白胨 6g
酵母膏 2g
牛肉膏 2g
酷酸铵 3g
KH2PO4 5 g
中性红 0.2g
MgSO4·7H2O 0.2 g
FeSO4·7H2O 0.01 g
蒸馏水 1000 mL
pH6.2
制法:
(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至6.2,分装于适当容器;
(2)0.1 MPa灭菌 20 min。
用途:用于厌氧菌培养。
27.碳酸钙明胶麦芽汁培养基
成分:
麦芽汁(6波美) 1000mL
蒸馏水 1000 mL
CaCO3 10 g
明胶 10 g
pH 6.8
(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至6.8,分装于适当容器;
(2)0.1 MPa灭菌 20 min。
用途:用于厌氧菌培养。
28.BCG 牛乳培养基
成分:
A溶液:脱脂乳粉 100g
蒸馏水 500 mL
1.6%溴甲酚绿(B.C.G)
乙醇溶液 1mL
B溶液:酵母膏 10g
蒸馏水 500 mL
琼脂 20 g
pH 6.8
制法:A、B液分开灭菌。
(1)A溶液:80 ℃灭菌20 min;
(2)B溶液:0.1MPa灭菌20min;
(3)无菌操作趁热将A、B溶液混合均匀后倒平板;
用途:用于乳酸菌发酵。
29.乳酸菌培养基
成分:
牛肉膏 5g
酵母膏 5g
蛋白胨 10g
葡萄糖 10g
乳糖 5g
NaCl 5 g
蒸馏水 1000 mL
pH 6.8
制法:
(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至6.8,分装于适当容器;
(2)0.1 MPa 灭菌 20 min。
用途:用于乳酸发酵。
30.酒精发酵培养基
蔗糖 10 g
MgSO4·7H2O 0.5g
NH4NO3 0.5 g
20%豆芽汁 2mL
KH2PO4 0.5g
蒸馏水 100ml
PH自然
制法:
(1)上述成分混合后,加热溶解,pH自然,分装于适当容器
(2)0.1 MPa灭菌 20 min。
用途:用于酒精发酵。
31.基本培养基
成分:
Na2HPO4·7H2O 1g
MgSO4·7H2O 0.2g
葡萄糖 5g
NaCl 5 g
K2HPO4 1g
蒸馏水 1000 mL
pH 7.0
制法:
(1)上述成分混合后,加热溶解,调节pH至7.0,分装于适当容器;
(2)0.1 MPa灭菌 30 min。
用途:用于筛选营养缺陷型细菌。
32.丙二酸盐培养基(缩水苹果酸钠培养基)
成分:
丙二酸钠 0.3g
酵母浸膏 0.1g
NaCl 0.2 g
硫酸铵 0.2g
K2HPO4 0.06g
磷酸二氢钾 0.04 g
蒸馏水 100mL
pH 6.8
0.2%溴麝香酚兰乙醇1.25 mL
制法:
(1)将上述各成分(溴麝香草酚蓝除外)加入溶解,调节pH至6.8;
(2)加人溴麝香草酚蓝、混匀,分装试管,每管约5mL;
(3)0.1 MPa灭菌 30 min。
用途:测定细菌能否利用丙二酸盐为碳源。
33.复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 5g
酵母浸膏 5g
琼脂 20 g
乳糖 10g
K2HPO4 0.5g
无水亚硫酸钠 5g
5%碱性复红乙醇溶液20mL
蒸馏水 1000mL
制作:
(1)将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加人900mL水中,加热溶解;
(2)再加人K2HPO4,溶解后补水至1000mL,调节pH至7.2~7.4,然后加人乳糖混匀溶解;
(3)115℃湿热灭菌20 min;
(4)再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中,用少许无菌水使其溶解,在水浴中煮沸10min后,立即滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色转变为淡粉红色为止;
(5)将此混合液全部加入上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中,混匀后立即倒平板,待凝固后存放冰箱备用,若颜色由淡红变为深红,则不能再用。
用途:用于水体中大肠菌群测定。
34.LB(Luria-Bertani)培养基
成分:
胰蛋白胨 10g
NaCl 5g
酵母膏 10g
蒸馏水 1000mL
pH 7.2
制法:
(1)上述成分混合后,加热溶解,pH调至7.2,分装于适当容器
(2)0.1MPa灭菌20min。
用途:细菌培养。
35.LAB 培养基
成分:
牛肉膏 10g
酵母膏 10g
乳糖 20 g
吐温-80 1 mL
CaCO3 10 g
K2HPO4 2g
琼脂 10g
蒸馏水 1000mL
pH 6.6
制法:121 ℃灭菌 20 min。
用途:用于乳酸菌活菌计数。
36.MRS 培养基
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 10g
酵母膏 5g
葡萄糖 20g
吐温-80 1mL
K2HPO4 2g
三水乙酸钠 5g
柠檬酸三铵 2g
MgSO4·7H2O 0.58g
MnSO4·4H2O 0.25g
琼脂 15g
蒸馏水 1000mL
pH 6.2~6.6
制法:121 ℃灭菌 20 min。
用途:用于乳酸菌活菌分离、培养及计数
37.乳糖蛋白胨液体培养基
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
乳糖 5g
NaCl 5 g
蒸馏水 1000 mL
pH 7.2~74
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL
制法:
(1)将牛肉膏、蛋白胨、乳糖、氯化钠各成分溶解于1000mL蒸馏水中,调节pH为7.2~7.4
(2)再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1m,充分混匀分装于试管,并放入倒置杜氏小管
(3)115℃高压灭菌20min,贮存于冷暗处备用,
用途:用于多管发酵法水中总大肠菌群的测定
38.二倍(三倍)浓缩乳糖蛋白胨液体培养基
将乳糖蛋白液体胨培养基中各成分除蒸馏水之外均扩大为2倍(或3倍)用量后加入蒸馏水中,制法同乳糖蛋白胨液体培养基。
充分混匀分装于试管,并放入倒置杜氏小管,115℃高压蒸汽灭菌20min。
用途:用于多管发酵法水中总大肠菌群的测定
参考文献
孙智杰, 刘芳. 基础微生物学实验指导. 北京理工大学出版社.
相关菌株
HZB875009
MRS琼脂培养基
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更新日期:2025-01-03
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