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解纤维素醋弧菌ATCC 33288/Acetivibrio cellulolyticus (CD2)

  • 货号 : HZB746114
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DSM 1870,分离自污水污泥

  • 规格 : 活化物(1-2周)
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 解纤维素醋弧菌ATCC 33288/Acetivibrio cellulolyticus (CD2)
别称 ATCC 33288, NRC 2248, CD2
形态特征
特征特性 细菌, NCBI分类编号:35830, 采于加拿大分离自污水污泥, 模式菌株, BSL 1
生长特性 37℃,8-14天,厌氧
主要用途 模式菌株
培养条件
培养基
使用方法 1.活化物(斜面/平板/菌液)使用:准备新鲜培养基, 使用接种环, 接种铲或无菌吸管, 将菌种转接至新鲜培养基, 放置到适宜培养环境, 2.①将冻存管放置在37-45℃水浴(霉菌30℃)溶解, 快速振摇溶解, ②使用酒精棉擦拭冻存管外壁消毒, 随后转移至安全柜操作, ③旋开管盖, 将溶解液全部吸出, 打入1-2个琼脂平板, ④涂布均匀后转移至上述培养条件下培养
传代方法 培养基成分:1.矿物质溶液1: 溶解3.90克K2HPO4于1000毫升蒸馏水中, 2.矿物质溶液2: 溶解2.40克KH2PO4, 6.00克(NH4)2SO4, 0.59克NaCl, 1.20克MgSO4·7H2O和0.72克CaCl2·2H2O于1000毫升蒸馏水中, 3.改良Wolin矿物质溶液: 首先溶解1.50克氮三乙酸(NTA), 用KOH调节pH至6.5, 然后加入3.00克MgSO4·7H2O, 0.50克MnSO4·H2O, 1.00克NaCl, 0.10克FeSO4·7H2O等其他微量元素, 最后用KOH调节pH至7.0, 4.FeSO4·7H2O溶液(0.1% w/v): 溶解1.00克FeSO4·7H2O于1000毫升0.1N H2SO4中, 注意该溶液不稳定, 需新鲜配制, 5.Wolin维生素溶液(10倍浓度): 包括生物素, 叶酸, 盐酸吡哆醇, 盐酸硫胺素, 核黄素, 烟酸, 泛酸钙, 维生素B12, 对氨基苯甲酸, α-硫辛酸等, 各成分总量为50-200毫克, 溶于1000毫升蒸馏水中, 培养基配置:1.主培养基: 混合75毫升矿物质溶液1, 75毫升矿物质溶液2, 10毫升改良Wolin矿物质溶液, 20毫升FeSO4·7H2O溶液(0.1% w/v), 0.5毫升重氮蓝(0.1% w/v), 1.5克Na2CO3, 3克纤维二糖, 以及可选的3克纤维素(MN300), 2.无氧处理: 除碳酸钠, 纤维二糖, 维生素, 半胱氨酸和硫化物外, 先溶解其他成分, 然后用80%氮气和20%二氧化碳混合气体通气30至45分钟制造无氧环境, 3.分装与灭菌: 在相同气体环境下将培养基分装入无氧Hungate管中并进行高压灭菌, 4.后续添加: 灭菌后, 从100%氮气下过滤灭菌的无氧储备液中添加纤维二糖, 维生素, L-半胱氨酸盐酸盐一水合物和Na2S·9H2O, 以及从80% N2和20% CO2混合气体下制备的碳酸钠无氧储备液, 调节最终培养基pH至7.2-7.4, 5.替代物: 可以用MN 300纤维素, Whatman CF II滤纸, Kleenex面巾纸或盐酸处理过的棉花作为纤维二糖的替代物
规格 活化物(1-2周)
保存说明 ①甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ②活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存1-2周
注意事项 注意厌氧环境培养, 推荐使用厌氧手套箱操作, 培养基需除氧
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