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嗜热甲烷八叠球菌 ATCC 43570/Methanosarcina thermophila (TM-1, DSM 1825)

  • 货号 : HZB723490
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DSM 1825,模式菌株,来自美国加利福尼亚州埃尔塞贡多的嗜热消化污泥

  • 规格 : 活化物(2-3周)
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 嗜热甲烷八叠球菌 ATCC 43570/Methanosarcina thermophila (TM-1, DSM 1825)
别称 TM-1, ATCC 43570, OCM 12, VKM B-1830
形态特征
特征特性 古细菌, 模式菌株, BSL 1, 来自美国加利福尼亚州埃尔塞贡多的嗜热消化污泥, NCBI分类编号:2210, 16S rRNA gene:M59140
生长特性 50℃,厌氧
主要用途 生物信息学
培养条件
培养基
使用方法 活化物(斜面/平板/菌液)使用:准备新鲜培养基, 使用接种环, 接种铲或无菌吸管, 将菌种转接至新鲜培养基, 放置到适宜培养环境
传代方法 培养基成分:K2HPO4:0.35 g, KH2PO4:0.23 g, NH4Cl:0.50 g, MgSO4·7H2O:0.50 g, CaCl2·2H2O:0.25 g, NaCl:2.25 g, FeSO4·7H2O 溶液 (0.1% w/v):2.00 ml(FeSO₄·7H₂O:1.00g, H₂SO₄ (0.1 N):1000.00ml, 亚铁硫酸盐溶液不稳定, 需要新鲜配制), 微量元素溶液 SL-10:1.00 ml(盐酸 (HCl, 25%):10.00ml, 四水合氯化铁:1.50g, 氯化锌:70.00mg, 四水合氯化锰:100.00mg, 硼酸:6.00mg, 六水合氯化钴:190.00mg, 二水合氯化铜:2.00mg, 六水合氯化镍:24.00mg, 二水合钼酸钠:36.00mg, 蒸馏水:990.00ml, 首先将氯化铁溶解在盐酸中, 然后稀释在水中, 加入并溶解其他盐类, 最终定容至1000.00毫升), 酵母提取物 (OXOID):2.00 g, Casitone (BD BBL):2.00 g, Na-acetate:2.50 g, 钠性亚甲蓝 (0.1% w/v):0.50 ml, NaHCO3:2.00 g, 甲醇 (50% v/v):20.00 ml, Wolin's 维生素溶液 (10x):1.00 ml(生物素:20.00mg, 叶酸:20.00mg, 盐酸吡哆醇:100.00mg, 盐酸硫胺 :50.00mg, 核黄素:50.00mg, 烟酸:50.00mg, 钙-D-(+)泛酸 :50.00mg, 维生素B12:1.00mg, 对氨基苯甲酸:50.00mg, (DL)-α-硫辛酸:50.00mg, 蒸馏水:1000.00ml), L-半胱氨酸盐酸盐 (L-Cysteine HCl·H2O):0.30 g, Na2S·9H2O:0.30 g, 蒸馏水:1000.00 ml; 使用方法:将除碳酸氢钠, 维生素, 甲醇, 半胱氨酸和硫化物之外的所有成分溶解于蒸馏水中, 使用80% N2和20% CO2气体混合物吹扫介质30-45分钟, 使其成为厌氧状态, 然后加入并溶解碳酸氢钠, 调整pH至6.5, 然后在80% N2和20% CO2气体氛围下分配介质到厌氧型Hungate管或血清瓶中, 填充量为其总体积的30%, 并进行高压灭菌, 甲醇(50% v/v储备溶液)和还原剂分别在100% N2气体氛围下单独高压灭菌, 作为浓缩溶液装在密封良好的试管中, 维生素在100% N2气体氛围下准备, 并通过过滤灭菌, 用注射器将适量的储备溶液注入到无菌介质中, 如有必要, 将完整介质的pH值调整至6.8-7.0
规格 活化物(2-3周)
保存说明 ①甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ②活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存2-4周
注意事项 培养基需补充5% (v/v) 澄清瘤胃液(从牛或羊(来源于瘘管动物或屠宰场废弃物)获取瘤胃液, 并通过棉布过滤, 将过滤后的瘤胃液在121°C下高压灭菌15分钟, 然后以27, 000 g离心20分钟, 上清液通过100% N2气体吹扫15分钟来使其成为厌氧状态, 在相同的气体氛围下将上清液分配到厌氧型血清瓶中, 填充量为其总体积的30%, 然后储存在-20°C冷冻条件下)并调整pH至6.5-6.8
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