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产品名称 | 热液迪硫微菌JCM 19990/Dissulfurimicrobium hydrothermale (VKM B-2854) |
别称 | VKM B-2854 |
形态特征 | |
特征特性 | 细菌, 分离自俄罗斯堪察加半岛乌宗火山口的热液池, NCBI分类编号:1750598, 模式菌株, BSL 1 |
生长特性 | 50℃,厌氧 |
主要用途 | 模式菌株 |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | ①冻干粉(安瓿管包装):用75%酒精擦拭消毒, 酒精灯灼烧顶部, 迅速滴水破裂, 用镊子敲碎, 吸取少量液培或无菌水, 溶解冻干粉, 转入新鲜的培养基, 置入适宜的培养环境, 等待菌株生长, 为保证复苏效果, 冻干粉须全部用完, 且不宜过多转接, ②活化物(斜面/平板/菌液)使用:准备新鲜培养基, 使用接种环, 接种铲或无菌吸管, 将菌种转接至新鲜培养基, 放置到适宜培养环境 |
传代方法 | 培养基成分:氯化铵:0.33g, 氯化钾:0.33g, 六水合氯化镁:0.33g, 二水合氯化钙:0.33g, 磷酸二氢钾:0.33g, 微量元素溶液:10.0ml(配方:((NH4)2Fe(SO4)2·6H2O): 78.4 mg, CoCl2·6H2O: 23.8 mg, NiCl2·6H2O: 16.6 mg, Na2MoO4·2H2O: 2.42 mg, Na2WO4·2H2O: 5.49 mg, ZnSO4·7H2O: 14.4 mg, CuCl2·2H2O: 0.17 mg, Na2SeO4: 9.45 mg, H3BO3: 0.62 mg, MnCl2·4H2O: 19.8 mg, SrSO4: 0.92 mg, CrK(SO4)2·12H2O: 0.5 mg, AlCl3·6H2O: 2.41 mg, BaCl2: 2.08 mg, Na2SiO3·9H2O: 14.2 mg, KBr: 11.9 mg, KI: 16.6 mg, Na2SO4: 71.0 mg, 蒸馏水: 1.0 L.), 蒸馏水:800.0ml, pH值:6.5-6.8; 使用方法:将以上成分混合, 煮沸后在纯CO2气流下冷却, 同时加入微量维生素:10.0ml(成分:生物素:2.0mg, 叶酸:2.0mg, 盐酸吡哆醇:10.0mg, 盐酸硫胺素:5.0mg, 核黄素:5.0mg, 烟酸:5.0mg, 泛酸钙:5.0mg, 维生素B12:0.1mg, 对氨基苯甲酸:5.0mg, 硫辛酸:5.0mg, 蒸馏水:1.0L), 碳酸氢钠:2.0g, CO2吹气3-4分钟, 调整pH值至6.5-6.8, 在CO2气流下加入铁羟基氧化物悬浮液:200.0ml, 分装, 加入硫粉:5.0g, 使用丁基橡胶塞密封培养容器, 并在105°C下高压灭菌1小时, 备用注:铁羟基氧化物悬浮液配制:在磁力搅拌器上, 缓慢滴定320毫升六水合氯化铁 (FeCl3·6H2O) 溶液(浓度为60.0克/升)与10%(重量/体积)的氢氧化钠溶液, 直至pH值达到7.0 - 7.5(大约需要80-100毫升氢氧化钠溶液), 将铁羟基氧化物移入容器中, 用水覆盖并在室温下过夜, 以2000转/分钟的速度离心5分钟后去除上清液, 再次清洗铁羟基氧化物, 离心并去除上清液, 最后, 将铁羟基氧化物悬浮在200毫升水中 |
规格 | 活化物(1-2周) |
保存说明 | ①真空冻干法, 制备为冻干粉, 保存于2-8℃冰箱, 能够保存2年以上, ②甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ③活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存1-2周 |
注意事项 | 注意厌氧环境培养, 推荐使用厌氧手套箱操作, 培养基需除氧 |
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