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紫红变色菌DSM 180/Allochromatium vinosum

  • 货号 : HZB497983
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DSM 180,分离自排水沟里的水

  • 规格 : 活化物(2周)
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 紫红变色菌DSM 180/Allochromatium vinosum
别称 ATCC 17899
形态特征
特征特性 细菌, NCBI分类编号:1049, 分离自排水沟里的水, 模式菌株, BSL 1
生长特性 25℃,厌氧,光照
主要用途 模式菌株
培养条件
培养基
使用方法 1.活化物(斜面/平板/菌液)使用:准备新鲜培养基, 使用接种环, 接种铲或无菌吸管, 将菌种转接至新鲜培养基, 放置到适宜培养环境, 2.①将冻存管放置在37-45℃水浴(霉菌30℃)溶解, 快速振摇溶解, ②使用酒精棉擦拭冻存管外壁消毒, 随后转移至安全柜操作, ③旋开管盖, 将溶解液全部吸出, 打入1-2个琼脂平板, ④涂布均匀后转移至上述培养条件下培养
传代方法 培养基成分:Solution A:氯化钙二水合物(CaCl2 x 2 H2O):0.25g, 酵母提取物:0.25g, 蒸馏水:460.00ml, 将上述成分混匀, 分装10次, 每次46ml到100ml的螺旋盖瓶中, 用N2/CO2气体泡腾后, 121°C高压灭菌15分钟, (对于海洋或河口隔离株, 向此溶液中添加100.0gNaCl, 并增加硫酸镁七水合物(MgSO4 x 7 H2O)至15.0g, )Solution B:硫化钠九水合物(Na2S x 9 H2O):2.00g, 蒸馏水:135.00ml, 在螺旋盖瓶中配制, 用N2气体替换空气, 紧密封盖后高压灭菌, Solution C:碳酸氢钠(NaHCO3):1.50g, 蒸馏水:50.00ml, 用CO2气体泡腾, 过滤灭菌, 装入无菌, 气密的100ml螺旋盖瓶中, Solution D:亚甲蓝(0.1%):0.5ml, 蒸馏水:450.00ml, 在棉塞Erlenmeyer烧瓶中高压灭菌, 烧瓶出口管连接至玻璃出口, 底部连接硅橡胶管, 带有夹子和钟罩, 用于无菌分配培养基到瓶中, 在N2/CO2气氛下冷却至室温, Solution E:氯化铵:0.35g, 乙酸铵:0.25g, 钠盐丙酮酸:0.25g, 葡萄糖:0.25g, 硫酸镁七水合物(MgSO4 x 7 H2O):0.50g, 氯化钾(KCl):0.35g, 磷酸二氢钾(KH2PO4):0.35g, 微量元素溶液SL-12 B:1.00ml, 蒸馏水:25ml, 过滤灭菌, 装入无菌, 气密的100ml螺旋盖瓶中, Solution F:维生素B12:0.01g, 蒸馏水:100.00ml, 过滤灭菌, 微量元素溶液SL-12 B:, 蒸馏水:1000.00ml, EDTA二钠盐(Na2-EDTA):3.00g, 硫酸亚铁七水合物(FeSO4 x 7 H2O):1.10g, 氯化钴六水合物(CoCl2 x 6 H2O):190.00mg, 氯化锰二水合物(MnCl2 x 2 H2O):50.00mg, 氯化锌:42.00mg, 氯化镍六水合物(NiCl2 x 6 H2O):24.00mg, 焦钼酸钠二水合物(Na2MoO4 x 2 H2O):18.00mg, 硼酸(H3BO3):300.00mg, 氯化铜二水合物(CuCl2 x 2 H2O):2.00mg, 调整pH至6.0, 使用方法:混合Solution D, C和E, 在冰浴中CO2气体下泡腾, 保持无菌条件, 在每个SolutionA瓶中加入50ml, 使用前, 添加4mlSolution B和0.1mlSolution F, 使用过滤灭菌的1M碳酸钠调整pH至7.1-7.3, 在N2气氛下, 填充到无菌, 充N2的螺旋盖管中, 最初的24小时内, 培养基中的铁以黑色絮状沉淀形式析出, 培养基中不应出现其他沉淀, 定期补充中和的3%硫化钠溶液以补充硫化物和其他补充溶液, 中和的硫化钠溶液:蒸馏水:100.00ml, 硫化钠九水合物(Na2S x 9 H2O):3.00g在带有丁基橡胶隔膜和磁力搅拌器的250ml螺旋盖瓶中准备硫化钠溶液, 用氮气泡腾, 密封后121°C高压灭菌15分钟, 冷却至室温后, 逐滴加入无菌2M硫酸(H2SO4), 不打开瓶盖, 调整pH至约7.0, 黄色的出现表明pH下降至约8, 溶液应持续搅拌以避免硫元素沉淀, 最终溶液应清澈且呈黄色
规格 活化物(2周)
保存说明 ①甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ②活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存1-2周
注意事项 注意厌氧环境培养, 推荐使用厌氧手套箱操作, 培养基需除氧
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