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沼泽甲烷杆菌 ATCC BAA-1077/Methanobacterium palustre (DSM 3108)

  • 货号 : HZB420698
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NBRC 105230,模式菌株,采于德国,分离自泥炭沼泽

  • 规格 : 活化物(2-3周)
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 沼泽甲烷杆菌 ATCC BAA-1077/Methanobacterium palustre (DSM 3108)
别称 DSM 3108, OCM 238, ATCC BAA-1077
形态特征
特征特性 古细菌, 模式菌株, BSL 1, 采于德国, 分离自泥炭沼泽, NCBI分类编号:2171, 16S rRNA gene: AF093061, 种微生物能够利用甲酸(formate)作为底物, 同时也能利用80%氢气(H₂)和20%二氧化碳(CO₂)的混合气体作为底物, 如果使用甲酸作为底物, 则气体混合物可以改为80%氮气(N₂)和20%二氧化碳(CO₂), 或者100%氮气(N₂), 在1000倍放大下观察, 细胞呈现为长杆状, 可以单独出现, 成对出现, 或是聚集在一起形成簇状
生长特性 37℃,厌氧
主要用途 产甲烷
培养条件
培养基
使用方法 活化物(斜面/平板/菌液)使用:准备新鲜培养基, 使用接种环, 接种铲或无菌吸管, 将菌种转接至新鲜培养基, 放置到适宜培养环境
传代方法 培养基成分:KH₂PO₄:0.50g, MgSO₄·7H₂O:0.40g, NaCl:0.40g, NH₄Cl:0.40g, CaCl₂·2H₂O:0.05g, 微量元素溶液SL-10:1.00ml(HCl (25%):10.00ml, FeCl₂·4H₂O:1.50g, ZnCl₂:70.00mg, MnCl₂·4H₂O:100.00mg, H₃BO₃:6.00mg, CoCl₂·6H₂O:190.00mg, CuCl₂·2H₂O:2.00mg, NiCl₂·6H₂O:24.00mg, Na₂MoO₄·2H₂O:36.00mg, 蒸馏水:990.00ml, 首先将FeCl₂溶解于HCl中, 然后稀释在水中, 依次溶解其他盐类, 最后加水至1000.00ml), 酵母提取物(OXOID):1.00g, 醋酸钠:1.00g, 甲酸钠:2.00g, FeSO₄·7H₂O溶液(0.1% w/v):2.00ml(FeSO₄·7H₂O:1.00g, H₂SO₄ (0.1 N):1000.00ml, 亚铁硫酸盐溶液不稳定, 需要新鲜配制), 污泥液:50.00ml(酵母提取物:4.00g, 污泥:1000.00ml, 将0.4%酵母提取物加入来自厌氧消化器的污泥中, 氮气吹扫几分钟后, 在37°C下培养24小时, 离心后, 将清澈的上清液在氮气气氛下进行高压灭菌, 然后储存在8-12°C的暗处), 脂肪酸混合物:20.00ml(异丁酸:23.00ml, DL-2-甲基丁酸:27.00ml, 戊酸:27.00ml, 异戊酸:27.00ml, 蒸馏水:896.00ml, 使用浓NaOH调节pH值至7.5), 钠盐酸复红(0.1% w/v):0.50ml, NaHCO₃:4.00g, L-半胱氨酸盐酸盐一水合物:0.50g, Na₂S·9H₂O:0.50g, 蒸馏水:930.00ml; 使用方法:溶解步骤:除了碳酸氢钠, 半胱氨酸和硫化钠之外, 将所有成分溶解在蒸馏水中, 脱氧步骤:使用80%氢气和20%二氧化碳的混合气体对培养基进行吹扫30至45分钟, 以去除其中的氧气, 添加碳酸氢钠:加入碳酸氢钠并调整pH值到6.5, 分装与灭菌:在80%氢气和20%二氧化碳的气氛下, 将培养基分配到无氧的Hungate型试管或血清瓶中, 填充至容器体积的30%, 然后进行高压灭菌, 添加半胱氨酸和硫化钠:从预先制备好的无氧溶液中加入半胱氨酸和硫化钠, pH值调整:在使用前检查并必要时调整最终pH值到6.8 - 7.0, 详见https://www.dsmz.de/microorganisms/medium/pdf/DSMZ_Medium119.pdf
规格 活化物(2-3周)
保存说明 ①甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ②活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存2-4周
注意事项 在培养物开始生长且变得浑浊后, 可以添加无菌的80%氢气和20%二氧化碳混合气体至0.5 - 1巴过压
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