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Trypanosoma cruzi Chagas

  • 货号 : HZB391486
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ATCC PRA-376

  • 规格 :
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Trypanosoma cruzi Chagas
别称 TcVT-1
形态特征
特征特性 原生生物,寄生原生动物,产地:美国;弗吉尼亚州,分离基:恰加斯犬的血,宿主:BS-C-1（ATCC CCL-26）； Hs27（ATCC CRL-1634）； BALB/3T3 克隆 A31 (ATCC CCL-163)
生长特性 95% 空气，5% 二氧化碳,35-37℃
主要用途
培养条件
培养基
使用方法 细胞系维护 要从冷冻状态建立细胞培养物，请将 ATCC® CCL-26™、ATCC® CRL-1634™ 或 ATCC® CCL-163™ 的安瓿放入设定为 35-37°C 的水浴中（ 2-3 分钟）。将小瓶浸入刚好足以覆盖冷冻材料的位置。不要摇动小瓶。解冻后，立即无菌取出安瓿中的内容物，并接种到 T-25 组织培养烧瓶中的 10.0 mL 新鲜 ATCC® 30-2002 中，其中含有 10% (v/v) 热灭活胎牛血清 (HIFBS)*。使用 95% 空气、5% CO2 气体混合物对烧瓶进行脱气 10 秒。在 35-37°C CO2 培养箱中孵育，拧紧盖子。每周更换培养基 1-2 次。 *胎牛血清可从 ATCC 购买（ATCC® 30-2020；请联系 ATCC 销售人员订购）。血清暴露于 56°C 30 分钟即可热灭活。这种治疗将使补体途径的蛋白质失活。从冰箱中取出血清，并以 100 mL 等份无菌分配至无菌 125 mL 旋盖瓶中。将瓶子浸入 35°C 水浴中 5 分钟。请勿将瓶子直接从冰箱转移至 56°C。将瓶子转移到 56°C 水浴中并开始计时 30 分钟。为避免污染，请勿让浴缸中的水位接触螺旋盖的边缘。最好在瓶中的血清液位和瓶盖边缘之间留出一英寸，并将水浴注满至略高于血清液位的水位。为了确保精华液均匀受热，请每十分钟旋转瓶子。注意：一些供应商提供已热灭活的血清。转移细胞系 当细胞系形成汇合层时，除去所有培养基并用 3 mL 磷酸盐缓冲盐水 (PBS) (ATCC® 30-2200) 替换。将 T-25 烧瓶在 35-37°C 下孵育 25-30 分钟。除去所有 PBS，并用溶解在 Hank 平衡盐溶液 (ATCC® 30-2101) 中的 2 mL 0.25% (w/v) 胰蛋白酶代替。轻轻地将胰蛋白酶分布在单层上，除去胰蛋白酶，并将烧瓶置于 35-37°C 下 10 分钟。添加 2 mL 含 10% (v/v) HIFBS 的 ATCC® 30-2002，并通过交替将培养基吸入移液管并将内容物排出到单层上，分离仍然贴壁的任何细胞。将细胞悬浮液以 0.5 mL 等分试样分配到四个 T-25 烧瓶中，其中包含 10 mL 新鲜 ATCC® 30-2002（含 10% (v/v) HIFBS）。使用 95% 空气、5% CO2 气体混合物对烧瓶进行脱气 10 秒。在 35-37°C CO2 培养箱中孵育，拧紧盖子。储存和培养启动 用干冰包装的冷冻安瓿应立即解冻或储存在液氮中。如果没有液氮储存设施，冷冻安瓿可在 -70°C 或以下储存约一周。在任何情况下都不要将冷冻安瓿储存在冰箱冰柜温度（通常为 -20°C）下。在此温度下储存冷冻材料将导致培养物死亡。要解冻冷冻的安瓿，请将其放入 35-37°C 的水浴中，使安瓿的边缘保持在水线上方。解冻时间约为2至3分钟。请勿摇动安瓿。解冻后请勿将安瓿留在水浴中。解冻后，立即将内容物无菌转移至含有新鲜单层宿主细胞系和 10 mL ATCC® 30-2002（含 10% (v/v) HIFBS）的 T-25 组织培养烧瓶中。使用 95% 空气、5% CO2 气体混合物对烧瓶进行脱气 10 秒。在 35-37°C CO2 培养箱中孵育，拧紧盖子。每天在倒置显微镜下观察培养物是否存在细胞内形式的寄生虫。通常在 5 至 7 天之间观察到锥鞭毛体从宿主细胞中出现。
传代方法 ATCC 培养基 2222：寄生虫细胞培养基
规格
保存说明 -80°C或更低保存1周,气相液氮可长期保存
注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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