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产品名称 | Lysinibacillus sp. bacteriophage G |
别称 | G [HER 276] |
形态特征 | |
特征特性 | 病毒,噬菌体,宿主:赖氨酸杆菌属PGH [她 1276] (ATCC 43725) |
生长特性 | 需氧,30℃ |
主要用途 | |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | 遵循下面给出的噬菌体繁殖的一般程序。赖氨酸杆菌属建议使用菌株 PGH (ATCC® 43725™) 作为繁殖宿主。噬菌体繁殖的一般程序 从小瓶中回收噬菌体: 在打开噬菌体样本之前,准备推荐宿主菌株的活跃生长的肉汤培养物。主机年龄应为 18-24 小时。在培养箱中预热推荐培养基的板。在表面覆盖 2.5 毫升融化的 0.5% 琼脂(相同的培养基),其中含有一两滴 18-24 小时宿主。软琼脂应保持在 43 至 45°C 直至准备倾倒。建议使用水浴。让覆盖层硬化。可以通过将 0.1 ml 噬菌体放入含有 0.9 ml 肉汤培养基的试管中来连续稀释噬菌体。根据需要重复任意数量的段落。许多菌株也可以在没有软琼脂覆盖的情况下进行滴定。将约 1.0 ml 宿主移液至每个板的表面。倾斜板以确保覆盖整个表面后,吸出多余的液体。表面干燥后,像以前一样将噬菌体的各种稀释液滴到表面上。注:在板上发现噬菌体可以更容易地观察裂解情况。如果在倒入平板之前将噬菌体直接添加到软琼脂中,则可能很难看到模糊或微小的噬菌斑。耐药宿主细菌也可能掩盖菌斑形成。繁殖噬菌体:可以通过如上所述制备具有软琼脂/宿主覆盖层的平板并用大约 0.5 ml 噬菌体覆盖表面来繁殖噬菌体。对于较大量,可以使用推荐的琼脂制备大尺寸 T 型烧瓶,并将约 12.0 ml 融化的软琼脂/宿主倒在表面上。然后让噬菌体在硬化的表面上运行。孵育24-48小时后,从琼脂平板表面刮下软琼脂。以约 1500 xg 离心 25 分钟以沉淀细胞碎片和琼脂。保存上清液。使上清液通过 0.22 µm Millipore 过滤器,并将滤液储存在 4-8°C 下。裂解物应在冷藏条件下长期保持活力。注:大多数噬菌体也可采用肉汤繁殖方法。除非另有说明,ATCC 使用 MH Adams 噬菌体(Interscience Publishers, Inc.,纽约,1959)中描述的 Adams 琼脂覆盖法进行常规噬菌体生产。 |
传代方法 | |
规格 | |
保存说明 | 参见处理程序 |
注意事项 | 更多信息请前往ATCC官网获取 |
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