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产品名称 | Methanobacterium subterraneum Kotelnikova et al. |
别称 | DSM 11074 [A8p] |
形态特征 | |
特征特性 | 古细菌,极端微生物,产地:瑞典;阿斯波岛,分离基:70 m 深处花岗岩隧道地下水 |
生长特性 | 80% 氢气,20% 二氧化碳,37℃ |
主要用途 | 生物技术 |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | 1. 用70%乙醇对Hungate试管顶部进行消毒。2.将 Hungate 试管中的气体交换为 80% H2 - 20% CO2.3。如果培养基被氧化(参见下面有关刃天青的讨论),则向培养基中添加 0.1 ml 还原剂 (1.5% Na2S.9H2O),并在接种前让培养基静置 30 分钟。4.当 Hungate 试管准备好接种时,将冷冻液氮小瓶置于无氧气流下并在室温下解冻。 5.使用死腔已充满厌氧气体混合物或还原剂(见下文)的注射器,从小瓶中抽出细胞悬浮液并转移至推荐肉汤的单管(5至6毫升)中。6。有氧血板可以划线检查纯度。7。在 37oC 厌氧条件下孵育管。 8. 在 37oC 下有氧孵育血板。 7 至 10 天内,通过沉降到试管底部的浑浊度,可以明显看出生长情况。有氧培养的血琼脂平板上不应出现生长。厌氧条件:A. Balch 管(可从新泽西州瓦恩兰的 Bellco Glass 购买;专为厌氧工作而设计,并使用铝制卷边盖将橡胶塞固定到位。针可以轻松地穿过塞子插入,并且管可以加压至 2 个大气压或者,可以使用血清瓶,或带有丁基橡胶塞的螺旋盖管,在后一种情况下,可以移除塞子并将管放置在分配无菌、无氧气体的插管系统下以添加还原剂或接种。 B. 刃天青是一种常用的氧化还原指示剂,当氧化还原电位高于 –50 mv 时呈粉红色,当氧化还原电位低于 –110 mv 时呈无色,即高度还原性。大多数严格厌氧菌需要这种低氧化还原电位才能实现最佳生长。 C. 要获得完全还原的培养基,必须使培养基缺氧并添加还原剂。常见的还原剂有硫化钠、半胱氨酸、二硫苏糖醇和柠檬酸钛。D. 可以通过以下方法之一使注射器厌氧:两种方法。 1. 用无菌管置换注射器中的死腔 2. 用无菌管置换注射器中的死腔 |
传代方法 | ATCC 培养基 1892:甲烷杆菌培养基 (DSM 119) |
规格 | |
保存说明 | |
注意事项 | 更多信息请前往ATCC官网获取 |
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