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Methanothermobacter thermautotrophicus (Zeikus and Wolfe) Wasserfallen et al.

  • 货号 : HZB370501
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ATCC 43169

  • 规格 :
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Methanothermobacter thermautotrophicus (Zeikus and Wolfe) Wasserfallen et al.
别称 DSM 3267 [AC 60]
形态特征
特征特性 古细菌,极端微生物,产地:德国;联邦德国,分离基:沼气厂
生长特性 80% 氢气，20% 二氧化碳,60℃
主要用途 生物技术
培养条件
培养基
使用方法 1. 用 70% 乙醇喷洒 Balch 管顶部，然后灼烧顶部，对其顶部进行消毒。 2．将试管中的气体交换为 80% H2 20% CO2，加压不要超过 5psi。如果试管压力过大 (20 psi)，则接种试管将变得困难。 3. 准备接种管：如果培养基为粉红色（参见刃天青 B 的讨论），每 100 ml 培养基添加 2.0 ml 还原剂（5% 辅酶 M 原液）。接种前，让培养基在室温下静置至少 1 小时或直至刃天青变为无色。4．在温和的厌氧气体流下解冻冷冻小瓶。使用尖端装有 22 号针头的厌氧（参见 E）1.0 ml 注射器，从小瓶中抽出细胞悬浮液，然后转移至 ATCC #1617 培养基管中。将 0.5 ml 接种的培养物转移至第二管 ATCC 培养基 #1617 中。用 80% 或 H2 20% CO2 将培养管加压至 20 psi。将 0.1 ml 接种的培养物接种到非选择性培养基上，并在 60°C 有氧条件下孵育平板。 60°C 孵育培养管。5．肉汤中应在 2 至 3 天内检测到生长。需氧平板上不应检测到生长。厌氧条件：A． Balch 管（可从新泽西州瓦恩兰的 Bellco Glass 购买；专为厌氧工作而设计，并使用铝制卷边盖将橡胶塞固定到位。针可以轻松地穿过塞子插入，并且管可以加压至 2 个大气压或者，可以使用血清瓶，或带有丁基橡胶塞的螺旋盖管，在后一种情况下，可以移除塞子并将管放置在分配无菌、无氧气体的插管系统下以添加还原剂或接种。 B. 刃天青是一种常用的氧化还原指示剂，当氧化还原电位高于 –50 mv 时呈粉红色，当氧化还原电位低于 –110 mv 时呈无色，即高度还原性。大多数严格厌氧菌需要这种低氧化还原电位才能实现最佳生长。 C.要获得完全还原的培养基，必须使培养基缺氧并添加还原剂，常见的还原剂有硫化钠、半胱氨酸、二硫苏糖醇、柠檬酸钛和辅酶M（见D）。我们建议在接种培养基前至少一小时将还原剂添加到培养基中。辅酶 M（巯基乙磺酸）（100 X 溶液）：将 5.0 g 溶解在 100 ml 去离子水中。分装到螺旋盖试管中，每管 5-6 ml，并在氮气下用橡胶塞密封。高压灭菌器进行灭菌。多余的试管可在室温下保存长达 2 个月。辅酶 M 是许多产甲烷菌产生的化合物。一些产甲烷菌对更强的还原剂（如硫化钠）敏感。辅酶 M 是我们在处理产甲烷菌时使用的标准还原剂。可以通过两种方法之一使注射器厌氧。
传代方法 ATCC 培养基 1617：甲烷细菌污泥培养基（ATCC 培养基 1471），pH 7.9
规格
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注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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