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Methanosarcina barkeri Schnellen

  • 货号 : HZB370493
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ATCC BAA-2329

  • 规格 :
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Methanosarcina barkeri Schnellen
别称 Fusaro
形态特征
特征特性 古细菌,极端微生物,产地:意大利,分离基:湖泥
生长特性 80% H2、20% CO2 (5 psi),30℃
主要用途
培养条件
培养基
使用方法 用 70% 乙醇喷洒 Balch 管顶部，然后燃烧顶部，对其顶部进行消毒。将三甲胺添加到肉汤中以达到 0.1 M 的水平。将试管中的气体交换为 80% H2 - 20% CO2。如果培养基为粉红色（参见有关刃天青的讨论），则每 10 mL 培养基添加 0.2 mL 辅酶 M（5% 库存溶液）。让培养基在室温下静置至少 24 小时，直至刃天青在接种前变成无色。如果培养基是浅蓝色或紫色，则它不是完全厌氧的。当 Balch 管准备好接种时，在室温下在 80% H2 - 20% CO2 气体的温和气流下解冻冷冻小瓶。添加 0.1 M 三甲胺。接种时，使用尖端装有 22 号针头的 1.0 mL 厌氧注射器，从小瓶中取出细胞悬浮液，然后将其转移到肉汤中。可以通过使用良好的厌氧技术转移 0.5 mL 初级肉汤来接种额外的 #2467 管。将 0.1 mL 的接种培养物接种到非选择性培养基上。接种后再次交换Balch管中的气体。将一块板在 37°C 下需氧孵育，另一块板在厌氧条件下孵育。在 30°C 下孵育厌氧管。应在 48 至 72 小时内检测到 #2467 肉汤中的初始生长。 5 至 7 天后即可观察到最佳生长。可能需要多次转移才能达到浅浊度。两个板上都不应检测到生长。厌氧条件：Balch 管是指一种特殊类型的试管，设计用于加压，适合厌氧工作。 Balch 试管可从 Bellco glass（www.bellcoglass.com；库存号 204800150）购买。刃天青是一种常用的氧化还原指示剂，当氧化还原电位高于 50 mv 时呈粉红色，当氧化还原电位低于 110 mv 时呈无色。即高度减少。大多数严格厌氧菌需要这种低氧化还原电位才能实现最佳生长。为了获得完全还原的培养基，必须使培养基缺氧并添加还原剂。常见的还原剂有硫化钠、3%半胱氨酸或1.5%硫化钠（储备液），每10 mL培养基添加0.2 mL还原剂。保藏者使用硫化钠作为还原剂，然而，由于其敏感性，辅酶 M 是 ATCC 在处理产甲烷菌时使用的标准还原剂。可以通过两种方法之一使注射器厌氧。用无菌无氧气体置换注射器中的死腔。用还原剂置换注射器中的死腔。
传代方法 ATCC 培养基 2467：MS - OCM 基础培养基
规格
保存说明 -80°C 或更低
注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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