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产品名称 | Methanosarcina mazei (Barker) Mah and Kuhn |
别称 | O1M9701 [OCM 748] |
形态特征 | |
特征特性 | 古细菌,极端微生物 |
生长特性 | 80% 氢气,20% 二氧化碳,37℃ |
主要用途 | |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | 用 70% 乙醇喷洒 Balch 管顶部,然后燃烧顶部,对其顶部进行消毒。如果需要,将试管内的气体更换为80% H2 -20% CO2;不要超过 5 PSI。如果培养基呈粉红色(参见有关刃天青的讨论),每 5-6 mL 培养基添加 0.1 mL 还原剂(1.5% Na2S.9H2O,储备溶液)。接种前,让培养基在室温下静置 10 至 20 分钟,直至刃天青变成无色。当 Balch 管准备好接种时,在无氧环境中打开小瓶解冻。接种时,使用尖端带有 22 号针头的 1.0 mL 注射器。使注射器厌氧(参见下面的讨论)并将解冻的细胞悬浮液吸入注射器中。将细胞悬浮液转移至预还原的 #2467 肉汤管中,并在 30°C 下孵育。可以通过转移 0.5 mL 的初级管来接种次级管。将 0.1 mL 接种的培养物接种到非选择性培养基上,并在 30°C 下有氧孵育。接种非选择性厌氧和需氧肉汤并在 30°C 下孵育。应在 5 至 7 天内检测到 #2467 肉汤中的生长情况。 Balch 管顶部空间的气体应每 2 至 3 天更换为新鲜的 80% H2 -20% CO2。需氧板上不应检测到任何生长。非选择性需氧或厌氧肉汤中不应有生长。厌氧条件:Balch 管是指一种特殊类型的试管,设计用于加压,适合厌氧工作。 Balch 试管可从 Bellco glass(www.bellcoglass.com;库存号 2048-00150)购买。刃天青是一种常用的氧化还原指示剂,当氧化还原电位高于-50 mv时呈粉红色,当氧化还原电位低于-110 mv时呈无色。即高度减少。大多数严格厌氧菌需要这种低氧化还原电位才能实现最佳生长。为了获得完全还原的培养基,必须使培养基缺氧并添加还原剂。常见的还原剂有硫化钠、半胱氨酸和辅酶-M(见下文)。可以通过两种方法之一使注射器厌氧。用无菌无氧气体置换注射器中的死腔。用还原剂置换注射器中的死腔 |
传代方法 | ATCC 培养基 2467:MS - OCM 基础培养基 |
规格 | |
保存说明 | -80°C 或更低 |
注意事项 | 更多信息请前往ATCC官网获取 |
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