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Bdellovibrio bacteriovorus Stolp and Starr

  • 货号 : HZB364469
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ATCC 15364

  • 规格 :
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 Bdellovibrio bacteriovorus Stolp and Starr
别称 118
形态特征
特征特性 细菌,产地:美国;加利福尼亚州,分离基:土壤
生长特性 需氧,30℃
主要用途
培养条件
培养基
使用方法 准备好新鲜的宿主文化。主机 ATCC®15365™ 可从 ATCC® 购买。或者，可以通过在营养板上划线并在 30°C 下孵育来从外食蛭弧菌制剂中回收宿主。一旦获得宿主的生长，就可以挑取宿主菌落并接种到营养肉汤中并在30℃下孵育。蛭弧菌可以通过多种方式繁殖。根据随附的说明打开小瓶。在肉汤中繁殖：将 0.5 mL 的新鲜宿主培养物接种到 5 - 10 mL ATCC® 培养基 2814 中。取 0.5 mL 该培养物并将其添加到小瓶中，以对干燥的沉淀进行再水合。将小瓶中的全部内容物添加回宿主培养物中。 30oC 下振荡孵育。双层技术：将 #2813 底部琼脂板置于 30°C 下加热约一小时。通过煮沸融化顶部琼脂管（2.5 – 3.0 mL 琼脂/管），然后将管放入 45°C 水浴中。一旦顶部琼脂冷却至 45oC，添加 0.3 mL 宿主 (15365™) 和 0.1 – 0.2 mL 噬菌蛭弧菌 (15364™)，用手滚动试管进行混合，然后倒入底部琼脂板。旋转平板，用顶部琼脂覆盖底部琼脂。将培养板置于室温下，直至顶部琼脂变硬。将倒置的板在 30°C 下孵育。 48至72小时后，通过光密度的降低可以检测到肉汤中蛭弧菌的生长。当用相差显微镜检查时，宿主细胞很大，是能运动的杆状细胞，并且单独或成对出现。蛭弧菌是一种小型弧菌形状的细胞，非常活跃。随着蛭弧菌的继续繁殖，它们的密度会增加，而宿主的密度会减少。如果使用双重后期技术，则在生长 3 至 4 天后，顶部琼脂中应出现噬菌斑。使用无菌显微镜载玻片，载玻片的一个边缘可用于刮掉顶部琼脂。可将顶部琼脂置于无菌锥形离心管中，并添加新鲜的#2814 肉汤。涡旋，然后让颗粒沉降。在相差显微镜下可在上清液中检测到蛭弧菌[见上文3)]。蛭弧菌在4℃保存可保存1周。通过离心浓缩细胞，然后重悬于含有 10% 甘油或 5% DMSO 的维持培养基中，可以长期保存蛭弧菌。将细胞分配到冷冻瓶中，并储存在至少 -80oC 的温度下。
传代方法 ATCC 培养基 137：Tris-YP 培养基
规格
保存说明
注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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