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产品名称 | Escherichia coli NanoLuc® |
别称 | |
形态特征 | |
特征特性 | 细菌,记者标记细菌 |
生长特性 | 需氧,37℃ |
主要用途 | 食品检测 |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | 试剂盒成分(9 个反应): 成分格式 体积储存 大肠杆菌 NanoLuc® 冷冻在甘油中 3 瓶 -80°C 或更低 Nano-Glo® 荧光素酶检测缓冲液 冷冻在甘油中 490 µL -20°C 或更低 Nano-Glo® 荧光素酶检测底物 冷冻在甘油中 12 µL -20°C 或更低 所需但未提供的设备和材料: 菌株繁殖和检测 胰蛋白酶大豆琼脂/肉汤 接种环 水浴 Eppendorf 管 70% 乙醇 棉签 37°C 培养箱 实验室纸 (Whatman) 移液器和提示 离心机 准备一个无菌试管,其中含有#18 肉汤(4 至 5 mL)。在 30°C 至 35°C 水浴中解冻样品,直至解冻(大约 5 分钟)。将安瓿浸入刚好足以覆盖冷冻材料的位置。请勿摇动安瓿。解冻后立即用 70% 乙醇擦拭安瓿并将悬浮液转移至肉汤管中。搅拌均匀。将培养物在 37°C 下孵育 24 小时。使用培养物作为大肠杆菌测定中的对照。对照菌株检测拭子方法:将 1 µL 底物与 49 µL 缓冲液混合,在 Eppendorf 管中制备反应溶液。用棉签收集几个菌落。用准备好的反应溶液浸透棉签。可视化记者在黑暗区域的表情。纸法:将 1 µL 底物与 49 µL 缓冲液混合,在 Eppendorf 管中制备反应溶液。用反应溶液浸透实验室试纸。将几个菌落收集到接种环上。在饱和纸上刮擦菌落。可视化记者在黑暗区域的表情。肉汤法:将 1 µL 底物与 49 µL 缓冲液混合,在 Eppendorf 管中制备反应溶液。离心 500 µL 肉汤培养物。除去上清液。将沉淀重新悬浮在反应溶液中。可视化记者在黑暗区域的表情。故障排除 问题:加入反应液后对照菌株不发光 原因 溶液过度传代,导致质粒丢失。菌株传代次数不要超过 2 次。反应溶液陈旧或制备不当。丢弃。用≥5%底物和95%缓冲液配制反应溶液。搅拌均匀。使用的反应溶液量不足。确保您的样品完全饱和。被另一种菌株污染。抛弃文化。从新鲜的文化开始。问题:冷冻培养物无法恢复 原因 解决方案 由于培养条件不当,培养物无法生长。检查培养条件(培养基、温度和气氛)是否合适。定期观察培养物以检查状况。恢复后增加培养时间。安全 请参阅相应的材料安全数据表,了解有关本产品组件的安全预防措施。 |
传代方法 | ATCC 培养基 18:胰蛋白酶大豆琼脂/肉汤 |
规格 | |
保存说明 | -80°C 或更低 |
注意事项 | 更多信息请前往ATCC官网获取 |
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