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产品名称 | Nitrobacter sp. |
别称 | AV 622 |
形态特征 | |
特征特性 | 细菌,极端微生物,产地:美国;明尼苏达州,苹果谷,分离基:土壤 |
生长特性 | 需氧,26℃ |
主要用途 | |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | 让小瓶解冻。将全部内容物转移到大试管 (20 X 150 mm) 或小烧瓶中的 5.0 mL #480 肉汤中。在 26°C、静态、黑暗中以倾斜位置孵育管以增加表面积。每天通过测定培养基中 NO2 的消失来监测培养物的生长:从培养物中取出 0.1 mL 并放入小试管中。添加一滴硝酸盐试剂 A,然后添加一滴硝酸盐试剂 B,每次添加后混合。 10 分钟内就会出现粉红色,并且与二氧化氮的存在量直接相关。最初的测试可能会是深洋红色,反映了介质 #480 的 3 mM NO2 浓度;但随着培养物的生长和 NO2 的氧化,颜色将变成洋红色、粉红色,最后变为透明。此过程可能需要长达 3 周的时间,具体取决于库存的生存能力。当所有 NO2 都被氧化后,将 5.0 mL 管培养物接种到含有 100 mL 培养基 #480 的 250 mL 烧瓶中。用箔纸包裹烧瓶避光,并在 26°C 下孵育并轻轻摇动。每天监测 NO2 浓度。当培养基中的 NO2 再次耗尽时,请将培养物转移到新鲜培养基中,或者通过添加额外的 NO2 来补料。建议使用 10% 的接种量进行转移。为了培养培养物,在无菌条件下添加无菌 NaNO2 溶液,使 NO2 浓度恢复到大约 10 mM(每 100 mL 培养物添加 3.5 mL 2% NaNO2)。当培养物可以在 24 小时内利用 10 mM NO2 并且在 1000 倍放大倍率下每个视野的细胞数量大于 10 个细胞时,应收获细胞或将其传代培养到新鲜培养基中。可以通过离心收获细胞。为了长期保存,可将浓缩细胞的 1.0 mL 等分试样用甘油作为冷冻保护剂冷冻,终浓度为 10%。冷冻小瓶应储存在 70°C 或以下,以获得最佳保存效果。 |
传代方法 | ATCC 培养基 480:硝化细菌培养基 203 |
规格 | |
保存说明 | -80°C 或更低 |
注意事项 | 更多信息请前往ATCC官网获取 |
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