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产品名称 | 巧克力瘤胃球菌ATCC 27760/Ruminococcus callidus (VPI S7-31) |
别称 | VPI S7-31 |
形态特征 | |
特征特性 | 细菌, 厌氧菌, 分离自粪便, 模式菌株, BSL 1, 参考文献:Skerman VB, et al. Approved lists of bacterial names. Int J Syst Bacteriol 30: 225-420, 1980. |
生长特性 | 37℃,厌氧 |
主要用途 | 模式菌株 |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | 将小瓶冷冻直至准备使用, 为了获得最佳生长效果, 在准备 #1016 肉汤时不要过滤掉肉颗粒, 为了在接种前减少培养基, 使用 3.0% 半胱氨酸, 然后将容器排气, 接种前添加 10% 体积的无菌瘤胃液(每 5 mL 肉汤0.5 mL), 在厌氧条件下, 最好在厌氧室中, 解冻小瓶, 然后快速将全部内容物转移到装有 #1016 肉汤的单管中, 也可以用 0.2 mL 的原始肉汤接种第二管 #1016 肉汤, 37°C 培养, 48 小时后即可观察到初始生长, 随后转移到肉汤中, 可能会生长得更快, 接种前, 向每个布鲁氏菌血板中添加 0.1 至0.2 mL 无菌瘤胃液, 在琼脂上生长可能需要长达72 小时, 可能需要从生长的肉汤培养物中接种平板, 厌氧条件:刃天青是一种常用的氧化还原指示剂, 当氧化还原电位高于-50 mv时呈粉红色, 当氧化还原电位低于-110 mv时呈无色, 即高度还原, 大多数严格厌氧菌需要这种低氧化还原电位才能实现最佳生长, 为了获得完全还原的培养基, 必须使培养基缺氧并添加还原剂, 有几种常见的还原剂, 但建议该菌株使用 3.0% 半胱氨酸, 为每管培养基添加 0.1 至0.2 mL 还原剂, 可以通过两种方法之一使注射器厌氧, 用无菌无氧气体置换注射器中的死腔, 用还原剂置换注射器中的死腔 |
传代方法 | 培养基成分:切碎肉肉汤(来自碎肉肉汤850ml) :50.0g, 蛋白胨:30.0g, 酵母浸粉:5.0g, 磷酸氢二钾:5.0g, 葡萄糖:4.0g, 纤维二糖:1.0g, 麦芽糖:1.0g, 淀粉:1.0g, 刃天青:0.001g, 半胱氨酸:0.5g, pH值:7.0±0.2(25℃); 使用方法:称取本品97.5g于850ml蒸馏水或去离子水中, 添加150ml瘤胃液, 加热煮沸1分钟以上, 冷却后通入氮气驱氧并在氮气环境下分装至厌氧培养管(管内需提前放入约1-2cm高度的庖肉牛肉粒, 121℃高压灭菌15分钟, 备用, 注:本品有氧状态下呈淡红色至蓝紫色, 无氧状态下呈黄色, 培养厌氧菌时需确保其呈黄色 |
规格 | 活化物(2周) |
保存说明 | ①甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ②活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存2-4周 |
注意事项 | 注意厌氧环境培养, 推荐使用厌氧手套箱操作, 培养基需除氧 |
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