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产品名称 | Y1HGold酿酒酵母/Saccharomyces cerevisiae Y1HGold |
别称 | Y1HGold |
形态特征 | |
特征特性 | 基因型:MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1Y1HGold菌株是GAL4-AbA酵母单杂系统用菌株, MATα型, 可直接转化质粒进行筛库试验, Transformation marker为:ura3, leu2, 报告基因为:AbAr, Y1HGold-GAL4-AbA 酵母单杂系统需要两种质粒配套使用:pAbAi 和PGADT7, 质粒pAbAi的筛选标志为URA, 用于表达pBait-AbAi construct (1~3个bait DNA序列重复串联后克隆到pAbAi中), 质粒pGADT7的筛选标志为LEU, 用于表达AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白 (Prey)的融合蛋白, GAL4-AbA酵母单杂系统原理:Aureobasidin A (AbA)是一种环酯肽抗生素, 在低浓度 (0.1-0.2 µg/ml)下即可对酵母产生毒性, 基因组中整合了pBait-AbAi 的酵母菌株 (Bait-Reporter Yeast Strains), 当猎物蛋白 (Prey)结合到诱饵序列 (Bait DNA)上, GAL4 AD就会激活AbAr的表达, 从而能够在含有抗生素AbA 的培养基上生长, AbAr与营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点, 可以降低酵母单杂假阳性发生的概率, 非模式菌株, BSL 1 |
生长特性 | 28℃,好氧 |
主要用途 | 科研,酵母单杂系统用菌株,MATα型,可直接转化质粒进行筛库实验 |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | ①冻干粉(安瓿管包装):用75%酒精擦拭消毒, 酒精灯灼烧顶部, 迅速滴水破裂, 用镊子敲碎, 吸取少量液培或无菌水, 溶解冻干粉, 转入新鲜的培养基, 置入适宜的培养环境, 等待菌株生长, 为保证复苏效果, 冻干粉须全部用完, 且不宜过多转接, ②活化物(斜面/平板/菌液)使用:准备新鲜培养基, 使用接种环, 接种铲或无菌吸管, 将菌种转接至新鲜培养基, 放置到适宜培养环境 |
传代方法 | 培养基成分:蛋白胨 20g, 酵母粉10g, 葡萄糖 20g, 琼脂:15.0g, pH7.2-7.4; 使用方法:称取本品65.0g于1L蒸馏水或去离子水中, 加热煮沸至完全溶解, 分装, 121℃高压灭菌15分钟, 灭菌结束后请摇匀, 备用 |
规格 | 冻干粉; 活化物(1-2周) |
保存说明 | ①真空冻干法, 制备为冻干粉, 保存于2-8℃冰箱, 能够保存2年以上, ②甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ③活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存1-2周 |
注意事项 | 使用:①活化前将冷冻管置于低温, 干燥处, 避免菌种衰退, ②开封, 复溶等操作应无菌进行, ③如发现冷冻管盖松, 复溶液浑等异常, 请停止使用, 保存:①根据细菌特性选择合适的培养基, ②培养后尽早取出放冰箱保存, 注意不同细菌的保存温度, 如真菌等需室温保存, ③保存时记录菌种鉴定结果, 包括生长情况, 菌落特征, 染色反应等, ④菌种分为两套保存, 一套用于保存传代, 一套用于实验, 定期转种, 每3代鉴定一次 |
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