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ArcticExpress(DE3)pRARE2大肠杆菌/Escherichia coli ArcticExpress(DE3)pRARE2

  • 货号 : HZB208750
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大肠杆菌表达菌株,基因型:E. coli B F– ompT hsdS(rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR] pRARE2 (CamR),具有四环素,庆大霉素,氯霉素抗性,用于科研,可以表达适应低温的伴侣蛋白Cpn10和Cpn60,降低包涵体的形成,增加可溶蛋白的表达量及生物活性

  • 规格 : 冻干粉; 活化物(1-2周)
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 ArcticExpress(DE3)pRARE2大肠杆菌/Escherichia coli ArcticExpress(DE3)pRARE2
别称 ArcticExpress(DE3)pRARE2
形态特征
特征特性 大肠杆菌表达菌株, 基因型:E. coli B F– ompT hsdS(rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR] pRARE2 (CamR), 非模式菌株, BSL 1, ArcticExpress (DE3) pRARE2来源于ArcticExpress (DE3), 将具有氯霉素抗性的pRARE2质粒导入ArcticExpress (DE3)细胞中即是ArcticExpress (DE3) pRARE2, 菌株染色体DNA中整合了λ噬菌体DE3区, 使其可同时表达T7 RNA聚合酶和RNA聚合酶, 广泛用于pET系列, pGEX, pMAL等质粒的蛋白表达, 菌株具有四环素, 庆大霉素, 氯霉素抗性, endA1突变有利于质粒DNA的稳定, [cpn10cpn60 GentR]的存在使ArcticExpress (DE3) pRARE2可以表达适应低温的伴侣蛋白Cpn10和Cpn60(来自嗜冷菌—Oleispira antarctica), Cpn10和Cpn60伴侣蛋白在4-12℃表现出较高活性, 在ArcticExpress(DE3) pRARE2细胞中表达时, 可降低重组蛋白包涵体的形成, 增加可溶重组蛋白的表达量及生物活性, 比传统的原核表达伴侣蛋白GroEL, GroES等具有更加优异的促融能力, 同时, pRARE2质粒可补充缺乏的7种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA和CGG)对应的tRNA, 提高外源基因的表达水平
生长特性 37°C,好氧
主要用途 科研,可以表达适应低温的伴侣蛋白Cpn10和Cpn60,降低包涵体的形成,增加可溶蛋白的表达量及生物活性
培养条件
培养基 LB琼脂培养基
使用方法 ①冻干粉(安瓿管包装):用75%酒精擦拭消毒, 酒精灯灼烧顶部, 迅速滴水破裂, 用镊子敲碎, 吸取少量液培或无菌水, 溶解冻干粉, 转入新鲜的培养基, 置入适宜的培养环境, 等待菌株生长, 为保证复苏效果, 冻干粉须全部用完, 且不宜过多转接, ②活化物(斜面/平板/菌液)使用:准备新鲜培养基, 使用接种环, 接种铲或无菌吸管, 将菌种转接至新鲜培养基, 放置到适宜培养环境
传代方法 培养基成分:酵母膏:5.0g, 蛋白胨:10.0g, 氯化钠:10.0g, 琼脂:15.0g, pH:7.0±0.2(25℃); 使用方法:称取上述成分, 加热溶解于1000mL蒸馏水中, 分装三角瓶, 121℃高压灭菌15分钟, 烘干后转移至超净工作台制作成平板
规格 冻干粉; 活化物(1-2周)
保存说明 ①真空冻干法, 制备为冻干粉, 保存于2-8℃冰箱, 能够保存2年以上, ②甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ③活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存1-2周
注意事项 使用:①活化前将冷冻管置于低温, 干燥处, 避免菌种衰退, ②开封, 复溶等操作应无菌进行, ③如发现冷冻管盖松, 复溶液浑等异常, 请停止使用, 保存:①根据细菌特性选择合适的培养基, ②培养后尽早取出放冰箱保存, 注意不同细菌的保存温度, 如真菌等需室温保存, ③保存时记录菌种鉴定结果, 包括生长情况, 菌落特征, 染色反应等, ④菌种分为两套保存, 一套用于保存传代, 一套用于实验, 定期转种, 每3代鉴定一次
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