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产品名称 | BL21-Star(DE3)pLysS大肠杆菌/Escherichia coli BL21-Star(DE3)pLysS |
别称 | BL21-Star(DE3)pLysS |
形态特征 | G-(红), 杆菌 |
特征特性 | 细菌, 基因型:F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)pLysS (CamR), 非模式菌株, BSL 1, BL21 Star(DE3)pLysS菌株来源于BL21(DE3), 含有rne131突变(RNaseE基因), RNaseE基因的突变降低了內源RNase的积累, 增强菌株细胞内mRNA的稳定性, 从而提高异源蛋白的表达水平, 主要适用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达, 同时含有RNA聚合酶, 也可用于非T7启动子表达载体(pGEX, pMAL等)的蛋白表达, 由于BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高, 所以不适合毒性蛋白的表达, BL21 Star(DE3)pLysS菌株携带pLysS质粒, 具有氯霉素抗性, pLysS含有表达T7溶菌酶的基因, T7溶菌酶可以作用于细胞壁上的肽聚糖溶解菌株, 还可与T7 RNA聚合酶结合抑制其转录活性, 进而降低目的基因的背景表达水平, 但不干扰IPTG诱导的表达, pLysS质粒含有p15A复制起始子, 可以和含有 pUC或pBR322等复制起始子的质粒兼容 |
生长特性 | 37°C,好氧 |
主要用途 | 科研,异源蛋白的基础表达水平提高,可同时用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达 |
培养条件 | |
培养基 | LB琼脂培养基 |
使用方法 | ①冻干粉(安瓿管包装):用75%酒精擦拭消毒, 酒精灯灼烧顶部, 迅速滴水破裂, 用镊子敲碎, 吸取少量液培或无菌水, 溶解冻干粉, 转入新鲜的培养基, 置入适宜的培养环境, 等待菌株生长, 为保证复苏效果, 冻干粉须全部用完, 且不宜过多转接, ②活化物(斜面/平板/菌液)使用:准备新鲜培养基, 使用接种环, 接种铲或无菌吸管, 将菌种转接至新鲜培养基, 放置到适宜培养环境 |
传代方法 | 培养基成分:酵母膏:5.0g, 蛋白胨:10.0g, 氯化钠:10.0g, 琼脂:15.0g, pH:7.0±0.2(25℃); 使用方法:称取上述成分, 加热溶解于1000mL蒸馏水中, 分装三角瓶, 121℃高压灭菌15分钟, 烘干后转移至超净工作台制作成平板 |
规格 | 冻干粉; 活化物(1-2周) |
保存说明 | ①真空冻干法, 制备为冻干粉, 保存于2-8℃冰箱, 能够保存2年以上, ②甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ③活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存1-2周 |
注意事项 | 使用:①活化前将冷冻管置于低温, 干燥处, 避免菌种衰退, ②开封, 复溶等操作应无菌进行, ③如发现冷冻管盖松, 复溶液浑等异常, 请停止使用, 保存:①根据细菌特性选择合适的培养基, ②培养后尽早取出放冰箱保存, 注意不同细菌的保存温度, 如真菌等需室温保存, ③保存时记录菌种鉴定结果, 包括生长情况, 菌落特征, 染色反应等, ④菌种分为两套保存, 一套用于保存传代, 一套用于实验, 定期转种, 每3代鉴定一次 |
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