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EPI400大肠杆菌/Escherichia coli EPI400

  • 货号 : HZB208539
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细菌,基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr,链霉素抗性,可降低质粒拷贝数,适合于各种不稳定 DNA 或毒性基因的克隆

  • 规格 : 冻干粉; 活化物(1-2周)
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 EPI400大肠杆菌/Escherichia coli EPI400
别称 EPI400
形态特征
特征特性 细菌, 基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr, 非模式菌株, BSL 1, EPI400来源于EC100菌株, 将EC100核基因中控制质粒拷贝数的pcnB基因删除后引入一个诱导启动子驱动的pcnB基因, 即是EPI100菌株, EPI400菌株可以降低质粒的拷贝数, 特别适合于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆, 在加入WDEPI-诱导剂 I 后又可以提高质粒产量到正常状态, [mcrA, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]基因型使EPI400菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA, recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取, lacZΔM15 标记的存在使EPI400可用于蓝白斑筛选, tonA赋予其抗噬菌体T1和T5的能力, rpsL赋予其链霉素抗性
生长特性 37°C,好氧
主要用途 科研,可降低质粒拷贝数,适合于各种不稳定 DNA 或毒性基因的克隆
培养条件
培养基 LB琼脂培养基
使用方法 ①冻干粉(安瓿管包装):用75%酒精擦拭消毒, 酒精灯灼烧顶部, 迅速滴水破裂, 用镊子敲碎, 吸取少量液培或无菌水, 溶解冻干粉, 转入新鲜的培养基, 置入适宜的培养环境, 等待菌株生长, 为保证复苏效果, 冻干粉须全部用完, 且不宜过多转接, ②活化物(斜面/平板/菌液)使用:准备新鲜培养基, 使用接种环, 接种铲或无菌吸管, 将菌种转接至新鲜培养基, 放置到适宜培养环境
传代方法 培养基成分:酵母膏:5.0g, 蛋白胨:10.0g, 氯化钠:10.0g, 琼脂:15.0g, pH:7.0±0.2(25℃); 使用方法:称取上述成分, 加热溶解于1000mL蒸馏水中, 分装三角瓶, 121℃高压灭菌15分钟, 烘干后转移至超净工作台制作成平板
规格 冻干粉; 活化物(1-2周)
保存说明 ①真空冻干法, 制备为冻干粉, 保存于2-8℃冰箱, 能够保存2年以上, ②甘油冻存管, 保存于-80℃超低温冰箱, 能够保存半年以上, ③活化物, 保存于2~8℃冰箱, 可保存1-2周
注意事项 使用:①活化前将冷冻管置于低温, 干燥处, 避免菌种衰退, ②开封, 复溶等操作应无菌进行, ③如发现冷冻管盖松, 复溶液浑等异常, 请停止使用, 保存:①根据细菌特性选择合适的培养基, ②培养后尽早取出放冰箱保存, 注意不同细菌的保存温度, 如真菌等需室温保存, ③保存时记录菌种鉴定结果, 包括生长情况, 菌落特征, 染色反应等, ④菌种分为两套保存, 一套用于保存传代, 一套用于实验, 定期转种, 每3代鉴定一次
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