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肠膜无色藻菌、戊糖片球菌、肯茨创伤球菌及黏液罗氏菌的形态与生化反应

来源:武汉市灰藻生物科技有限公司   浏览量:18   发布时间:2026-01-30 16:57:45

引言

无色藻菌属(Leuconostoc),也称明串珠菌属或四联球菌属,包括:肉无色藻菌(L. citreum)、乳酸无色藻菌(L. lactis)、柠檬无色藻菌(L. citreum)、肠膜无色藻菌(L. mesenteroides)、酸败气无色藻菌(L. gasicomitatum)、果糖无色藻菌(L. fructosum)、无花果无色藻菌(L. ficulneum)、假肠膜无色藻菌(L. pseudomesenteroides)和冷生无色藻菌(L. gelidum)等。代表菌种为肠膜无色藻菌

肠膜无色藻菌 L. mesenteroides

(一)肠膜无色藻菌形态与染色

革兰阳性球菌,菌体大小为(0.5~0.7)μm×(0.7~1.2)μm,呈卵圆形、球形、扁豆状等,成对、链状排列,肉汤培养液涂片染色呈杆状,无芽胞,无鞭毛(图 1)。

图 1肠膜无色藻菌纯培养的镜下形态

图 1肠膜无色藻菌纯培养的镜下形态

(二)肠膜无色藻菌培养特征

在血琼脂平板上35℃培养18~24 h,形成光滑、圆形、灰白色的细小菌落,α溶血或不溶血(图 2),与草绿色链球菌相似,极少数菌株有β溶血环。在液体肉汤培养基中浑浊生长,有沉淀现象。兼性厌氧菌,营养要求高,生长缓慢。

图 2肠膜无色藻菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

图 2肠膜无色藻菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

(三)肠膜无色藻菌生化特征

触酶试验阴性,对万古霉素耐药,主要生化反应见表 1。

试验结果试验结果
氧化酶硝酸盐
葡萄糖脲酶
乳糖吲哚
麦芽糖PYR
七叶苷精氨酸双水解酶
6.5% NaCl生长明胶

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;PYR,吡咯烷酮芳基酰胺酶

(四)肠膜无色藻菌鉴别要点

  1. 本菌特征
  2. 与片球菌的区别
  3. 与无色藻菌属内其他菌种的鉴别
菌名6.5% NaCl生长ONPG七叶苷阿拉伯糖纤维二糖葡萄糖葡萄糖酸盐乳糖麦芽糖甘露醇蜜二糖棉子糖水杨苷蔗糖木糖
乳酸无色藻菌-/+-/++/-+/-
柠檬无色藻菌dNDV+/-
假肠膜无色藻菌ND-/+VV-/+-/+V+/-
谲诈无色藻菌NDNDWND
肠膜无色藻菌
肠膜亚种d-/+-/++/-VW+/-
葡聚糖亚种+/-VVVVV
乳酸亚种V-/+-/+V-/+

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;+/-,多数阳性,少数阴性;-/+,多数阴性,少数阳性;W,迟缓反应;d,不同反应;V,结果可变;ND,无资料

(五)肠膜无色藻菌药敏试验的药物种类选择

药敏试验的药物种类选择见表 3。

抗菌药物名称
可选药物青霉素或氨苄西林、米诺环素、氯霉素
天然耐药万古霉素、替考拉宁

注:上述药敏试验所选药物仅有MIC判读折点,具体参照CLSI M45-A3文件

(六)肠膜无色藻菌结果解释与要点提示

无色藻菌广泛分布在植物和食物中,也存在于人胃肠道中,是一种条件致病菌,可引起肺炎、脑膜炎、心内膜炎、骨髓炎、尿路感染、脑脓肿、眼内膜炎等多种疾病。

从无菌部位如血液、深部组织等分离出的无色藻菌应进行药敏试验,严重感染如感染性心内膜炎,需青霉素类联合氨基糖苷类治疗

二、片球菌属(Pediococcus

包括乳酸片球菌(P. acidilactici)、小片球菌(P. parvulus)、有害片球菌(P. damnosus)、戊糖片球菌(P. pentosaceus)、糊精片球菌(P. dextrinicus)、意外片球菌(P. inopinatus)等,原马尿片球菌(P. urinaeequi)现已划归气球菌属,嗜盐片球菌(P. halophilus)现已划归至四联球菌属(Tetragenococcus)。代表菌种为戊糖片球菌

戊糖片球菌 P. pentosaceus

(一)戊糖片球菌形态与染色

革兰阳性球菌,直径1.2~2.0 μm,单个、成双或成堆排列,无芽胞,无荚膜,无鞭毛(图 3)。

图 3戊糖片球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

图 3戊糖片球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

(二)戊糖片球菌培养特性

在血琼脂平板上35℃培养18~24 h后,形成较小、灰色、不透明、α溶血菌落(草绿色样,见图 4),48 h之后逐渐增大。片球菌营养要求高,如有害片球菌需要半胱氨酸。有害片球菌、意外片球菌、小片球菌生长缓慢,2~5日才可生长出菌落。

图 4戊糖片球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

图 4戊糖片球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

(三)戊糖片球菌生化特性

氧化酶阴性触酶阴性,对万古霉素耐药,主要生化反应见表 4。

试验结果试验结果
6.5% NaCl生长核糖
精氨酸双水解酶木糖d
乳糖d松三糖
蔗糖海藻糖
阿拉伯糖糊精

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;d,11%~89%菌株阳性

(四)戊糖片球菌鉴别要点

  1. 本菌特征
  2. 与粪肠球菌的鉴别
  3. 片球菌属内菌种鉴定与鉴别
菌名40℃生长6.5% NaCl生长精氨酸双水解酶乳糖蔗糖阿拉伯糖核糖木糖松三糖海藻糖糊精淀粉
戊糖片球菌dd
乳酸片球菌ddd
有害片球菌dd
糊精片球菌dd
意外片球菌ddd
小片球菌d

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;d,11%~89%菌株阳性

(五)戊糖片球菌药敏试验的药物种类选择

戊糖片球菌药敏试验的药物种类选择见表 6。

抗菌药物名称
可选药物青霉素、氨苄西林、氯霉素、亚胺培南
天然耐药万古霉素、替考拉宁

注:上述药敏试验所选药物仅有MIC判读折点,具体参照CLSI M45-A3文件

(六)戊糖片球菌结果解释与要点提示

片球菌属是乳酸菌,普遍存在于发酵的蔬菜、乳制品、肉类等食品中。乳酸片球菌、戊糖片球菌是机会致病菌,可引起人类肝脓肿、菌血症、肺炎、肠炎、心内膜炎、腹膜炎、腹泻和尿路感染等疾病。

从无菌体液如血液、胸腔积液、腹水、深部组织等分离出的分离株应进行药敏试验,严重感染如感染性心内膜炎,需青霉素类联合氨基糖苷类治疗

三、创伤球菌属

创伤球菌属是1993年命名的一个新菌属。因大部分菌株是从创伤分泌物中分离的,故以创伤球菌命名。属内包括肯茨创伤球菌(H. kunzii)Helcococcus sueciensis(2004年从人类标本中新分离出的)。

肯茨创伤球菌 H. kunzii

(一)肯茨创伤球菌形态与染色

革兰阳性球菌(图 5)。

图 5 肯茨创伤球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

图 5 肯茨创伤球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

(二)肯茨创伤球菌培养特性

兼性厌氧菌,生长慢,初次分离需要在5%~10% CO₂环境中。在含有血清或吐温80血琼脂平板上35℃培养18~24 h,形成细小、圆形、凸起、浅灰白色的菌落(图 6)。往往与其他细菌共生。

图 6 肯茨创伤球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

图 6 肯茨创伤球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

(三)肯茨创伤球菌生化反应

触酶试验阴性,主要生化反应见表 7。

试验结果试验结果
葡萄糖6.5% NaCl生长
乳糖PYR
阿拉伯糖LAP
棉子糖明胶
核糖脲酶
山梨醇VP
七叶苷万古霉素S

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;S,敏感。PYR,吡咯烷酮芳基酰胺酶;LAP,亮氨酸氨基肽酶

(四)肯茨创伤球菌鉴别要点

  1. 本菌特征
  2. 与绿色气球菌属的鉴别
鉴别特性肯茨创伤球菌绿色气球菌
6.5% NaCl生长V
胆汁七叶苷
ONPG
蔗糖
甘露醇V

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;V,反应不定

  1. 与其他革兰阳性球菌的鉴别
菌名PYRLAPBGUR6.5% NaCl生长40%胆盐生长精氨酸双水解酶卫星现象万古霉素
创伤球菌NDNDS
缺陷乏养菌S
溶血孪生球菌NDNDS
毗邻颗粒链菌S
苛养颗粒链菌S
绿色气球菌NDVNDS
格鲁比卡球菌NDVNDS

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;V,11%~89%菌株阳性;ND,无资料;S,敏感。BGUR,β半乳糖苷酶;LAP,亮氨酸氨基肽酶;PYR,吡咯烷酮芳基酰胺酶

(五)肯茨创伤球菌药敏试验的药物种类选择

目前还没有相应的测定方法和解释标准。

(六)肯茨创伤球菌结果解释与要点提示

肯茨创伤球菌是一种机会致病菌,是人类和动物皮肤的常住菌群。可以从混合感染的外伤标本中分离到。少数创伤球菌会对青霉素和克林霉素敏感,大多数创伤球菌对红霉素耐药。

四、罗氏菌属

罗氏菌属有6个种,其中黏液罗氏菌(R. mucilaginosa,原来被称为黏滑口腔球菌)、龋齿罗氏菌(R. dentocariosa)和R. aeria被认为是与临床相关的。

黏液罗氏菌 R. mucilaginosa

(一)黏液罗氏菌形态与染色

革兰阳性球菌,多成双、四联状、葡萄状排列,菌体较葡萄球菌大,镜下立体感较强(图 7),有囊状感,有荚膜。

图 7黏液罗氏菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

图 7黏液罗氏菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

(二)黏液罗氏菌培养特性

在血琼脂平板上35℃培养18~24 h,形成光滑、圆形凸起、边缘整齐、树胶样、不溶血、灰白色菌落(图 8)。在麦康凯琼脂平板上不生长。

图 8黏液罗氏菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

图 8黏液罗氏菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

(三)黏液罗氏菌生化反应

触酶试验阴性,主要生化反应见表 10。

试验结果试验结果
触酶葡萄糖
氧化酶麦芽糖
葡萄糖O/FF蔗糖
硝酸盐甘露醇V
VP水杨苷
七叶苷果糖

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;V,不定;O/F,氧化/发酵

(四)黏液罗氏菌鉴别要点

  1. 本菌特征
  2. 与龋齿罗氏菌的鉴别
菌名触酶O/F硝酸盐七叶苷葡萄糖麦芽糖蔗糖甘露醇
黏液罗氏菌FV
龋齿罗氏菌VF

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;V,不定;F,发酵

  1. 与藤黄微球菌的鉴别
  2. 与葡萄球菌的鉴别

(五)药敏试验的药物种类选择

药敏试验的药物种类选择见表 12。

抗菌药物名称
可选药物青霉素、万古霉素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑

注:上述药敏试验所选药物仅有MIC判读折点,具体参照CLSI M45-A3文件

(六)黏液罗氏菌结果解释与要点提示

黏液罗氏菌由Migula于1900年首次报道,当时称黏液微球菌(M. mucilaginosa)。1907年由Andrewes和Gordon再次命名为唾液葡萄球菌(S. salivarius),1967年,Gordon基于其厌氧发酵葡萄糖的能力而进一步加以证实。1970年Bergan等提议将其再次命名为黏液微球菌。1982年由Bergan和Kocur根据其与微球菌和葡萄球菌生化特性的不同,将其另立为口腔球菌属,2000年《临床微生物手册》(第八版)将其作为罗氏菌属中的一个种,命名为黏滑罗氏菌。

黏液罗氏菌是存在于口腔中的正常菌群,也是一种机会致病菌,但对于来自无菌部位标本如血液、深部组织、植入假体装置的分离株,通常认为是致病菌。早在1994年Ben Salah H等报道了一例2岁血液病患者从脑脊液中检出此菌,诊断为黏液罗氏菌性脑膜炎;2002年Perez-Vega C等报道了一例脑动脉瘤患者,由于二尖瓣韧带脱垂,黏液罗氏菌引起的心内膜炎;Bureau Chalot F等在2003年报道了一例免疫力低下患者椎间盘术后感染此菌;Gmson D等报道了一例24岁女性患者,白血病化疗后出现肺炎,肺泡灌洗液没有培养出黏液罗氏菌,但从患者血液中两次检出此菌。随着引起感染的报道不断增加,临床检验人员在遇到镜下形态为成双、四联状排列的阳性球菌,不要认为是微球菌或污染菌,还应怀疑黏液罗氏菌的可能。

对杆菌肽、呋喃唑酮、新生霉素均敏感,对溶菌素和多黏菌素B耐药。ATB ID32-STAPH试条和BBL Crystal(Becton Dickinson)可准确鉴定黏液罗氏菌。

参考文献

周庭银, 章强强 主编. 临床微生物学诊断与图解(第4版)[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 2019.

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更新日期:2026-01-30

编制人:木木

审稿人:小藻





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