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4种典型球菌的染色形态、培养特征和生化反应等介绍

来源:武汉市灰藻生物科技有限公司   浏览量:26   发布时间:2026-01-30 13:17:48

绿色气球菌 A. viridans

(一) 绿色气球菌形态与染色

革兰阳性球菌,直径1.0~2.0μm,多呈四联状或成簇排列,亦可单个、成对排列,液体培养更倾向于四联状排列(图 1)。

图 1绿色气球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

图 1绿色气球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

(二) 绿色气球菌培养特性

血琼脂平板上35℃培养18~24h,形成圆形、凸起、针尖样大小小菌落,草绿色溶血环不明显,48h后菌落增大至1 mm,灰白色,草绿色溶血环明显(图 2),肉汤培养24h后呈均匀浑浊生长。

图 2绿色气球菌在血琼脂平板上的菌落特征(48h)

图 2绿色气球菌在血琼脂平板上的菌落特征(48h)

(三) 绿色气球菌生化反应

触酶阴性或弱阳性,可在pH9.6肉汤和40%胆汁中生长,精氨酸双水解酶试验VP试验均为阴性。主要生化反应见表 1。

试验结果试验结果
氧化酶β葡萄糖醛酸苷酶ND
葡萄糖+40%胆汁生长V
试验结果试验结果
6.5% NaCl生长+七叶苷+
吡咯烷酮芳基酰胺酶+马尿酸钠V
亮氨酸氨基肽酶万古霉素S

注: +,90%以上菌株阳性; —,90%以上菌株阴性; V,反应不定(11%~80%菌株为阳性); ND,无资料; S,敏感

(四) 绿色气球菌鉴别要点

1. 本菌特征

革兰阳性球菌草绿色溶血环PYR阳性6.5% NaCl肉汤中生长。

2. 与肠球菌属的鉴别

绿色气球菌亮氨酸氨基肽酶试验阴性,而肠球菌则相反。

3. 与其他气球菌的鉴别

见表 2。

菌名PYRLAPβ葡萄糖醛酸苷酶40%胆盐生长七叶苷马尿酸钠万古霉素
柯气球菌++S
血气球菌100100+10010094ND
尿气球菌0100+01193S
人尿气球菌+++ND
绿色气球菌1000ND809075S

注: +,90%以上菌株阳性; —,90%以上菌株阴性; 数字为测试菌株阳性率(%); ND,无资料; S,敏感

4. 气球菌及相关菌鉴别

见表 3。

菌名球杆状杆状葡萄糖产气万古霉素胆汁七叶苷PYR黄色素LAP
气球菌属SV—/++/-
乳球菌属+SVV+
片球菌属R++
链球菌属++SVV+
无色藻菌属+++R+
孪生球菌属S++
创伤球菌属SV+
肠球菌属+S++—/++

注: +,90%以上菌株阳性; —,90%以上菌株阴性; V,反应不定(11%~80%菌株为阳性); S,敏感; R,耐药; —/+,多数阴性,少数阳性; +/- ,多数阳性,少数阴性。PYR,吡咯烷酮芳基酰胺酶; LAP,亮氨酸氨基肽酶

(五) 绿色气球菌药敏试验的药物种类选择

绿色气球菌药敏试验的药物种类选择见表 4。

类别抗菌药物名称
必选青霉素、头孢曲松、万古霉素
可选头孢噻肟、美罗培南、环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑、利奈唑胺
天然耐药氨基糖苷类、红霉素、四环素

注: 上述药物只有MIC判读折点,具体参照CLSI M45 - A3最新版本文件

(六) 绿色气球菌结果解释与要点提示

(1) 绿色气球菌广泛分布于空气和土壤,可引起心内膜炎泌尿道感染脓毒性关节炎脑膜炎等疾病。女性患者的尿液标本中,尿气球菌和其他气球菌可引起侵袭性感染,应进行药物敏感试验

(2) 气球菌属通常对β-内酰胺类利奈唑胺万古霉素敏感,血气球菌和绿色气球菌对左氧氟沙星耐药,尿气球菌对复方磺胺甲噁唑体外敏感,但体内敏感度取决于尿液中叶酸的浓度(与患者饮食有关),因此报告复方磺胺甲噁唑耐药。

(3) 在临床标本分离培养后在血琼脂平板上若见到草绿色溶血的小菌落,镜下形态以四联状或簇状排列为主,触酶阴性或弱阳性,在6.5%NaCl中生长,应首先考虑气球菌。

溶血孪生球菌 G.haemolysans

(一) 溶血孪生球菌形态与染色

革兰阳性球菌,但易染成革兰阴性,呈肾形,成单或成对排列,多成对排列,也可四联状或短链状排列(图 3)。

图 3溶血孪生球菌纯培养镜下形态(革兰染色)

图 3溶血孪生球菌纯培养镜下形态(革兰染色)

(二) 溶血孪生球菌培养特性

血琼脂平板上35℃培养18~24 h,形成细小、凸起、光滑、有β溶血的菌落(图 4),与溶血性链球菌很相似,某些菌株可产生α溶血或不溶血。

图 4 溶血李生球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

图 4 溶血李生球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

(三) 溶血孪生球菌生化反应

触酶试验为阴性。主要生化反应见表 5。

试验结果试验结果
麦芽糖+山梨醇
蔗糖V碱性磷酸酶+
乳糖酸性磷酸酶+
覃糖APPA
甘露醇VP
七叶苷精氨酸双水解酶
吲哚脲酶

注: +,90%以上菌株阳性; —,90%以上菌株阴性; V,反应不定;APPA,丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸芳氨酶(alanine-phenylalanine-prolinearylamidase)

(四) 溶血孪生球菌鉴别要点

1. 本菌特征 革兰阳性球菌(容易染成阴性),菌落细小,有β溶血环,触酶试验阴性,分解葡萄糖等糖类。

2. 与无乳链球菌的鉴别 两者菌落特征、革兰染色均相似。但溶血孪生球菌CAMP试验阴性,而无乳链球菌则为阳性。

3. 与相似菌属的鉴别 见表 6。

特性孪生球菌属肠球菌属链球菌属无色藻菌属乳球菌属乏养菌属片球菌属格鲁比卡菌属差异球菌属创伤球菌
6.5% NaCl肉汤生长+VbVVV++V
PYR++VaV++++
LAPV++++++
葡萄糖产气+
七叶苷+VVVVV+++
万古霉素SVcSRSSSRSS

注: +,90%以上菌株阳性; —,90%以上菌株阴性; S,敏感; R,耐药; V,反应不定。a. 化脓链球菌和某些肺炎链球菌PYR阳性; b. D群链球菌和草绿色链球菌群阴性,B群链球菌阳性; c. 大部分菌株敏感(除外耐万古霉素肠球菌)

4. 与属内其他菌种的鉴别 见表 7。

菌名乳糖覃糖蔗糖麦芽糖山梨醇甘露醇碱性磷酸酶酸性磷酸酶
麻疹孪生球菌++VV
溶血孪生球菌V+++
伯氏孪生球菌V
大腭孪生球菌++++ND
兔孪生球菌+++
血孪生球菌++++++

注: +,90%以上菌株阳性; —,90%以上菌株阴性; V,反应不定; ND,无资料

(五) 溶血孪生球菌药敏试验的药物种类选择

溶血孪生球菌药敏试验的药物种类选择,见表 8。

抗菌药物名称
必选青霉素、头孢噻肟或头孢曲松、万古霉素
可选左氧氟沙星、克林霉素、美罗培南、红霉素

注: 上述药敏试验所选药物仅有MIC判读折点,具体参照CLSI M45 - A3最新版本文件

(六) 溶血孪生球菌结果解释与要点提示

孪生球菌已经从心内膜炎病例分离到,可引起肺脓肿菌血症骨髓炎心内膜炎脑膜炎脑脓肿感染性休克化脓性关节炎腹膜炎脓胸等疾病。麻疹孪生球菌、伯氏孪生球菌和血孪生球菌已从血培养中分离,已被证实是感染性心内膜炎的病原体。不解糖孪生球菌可从外伤伤口分泌物中分离。

本菌对青霉素链霉素四环素氯霉素万古霉素大环内酯类等药物敏感。来自无菌部位的分离株应进行药敏试验

麻疹孪生球菌 G.morbillorum

(一) 麻疹孪生球菌形态与染色

革兰阳性球菌,呈肾形卵圆形,成对、短链,不形成芽胞,无荚膜,无鞭毛(图 5),菌血症或脓毒血症患者血培养标本涂片查见革兰阳性球菌(图 6)。

图 5麻疹孪生球菌纯培养镜下形态(革兰染色)

图 5麻疹孪生球菌纯培养镜下形态(革兰染色)

图 6 麻疹李生球菌血培养标本涂片(革兰染色)

图 6 麻疹李生球菌血培养标本涂片(革兰染色)

(二) 麻疹孪生球菌培养特性

血琼脂平板上35℃培养18~24 h,形成圆形、边缘整齐、光滑、透明的菌落,不产生色素(图 7)。

(三) 麻疹孪生球菌生化反应

触酶试验为阴性。主要生化反应见表12-9-5。

图 7 麻疹孪生球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

图 7 麻疹孪生球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

(四) 麻疹孪生球菌鉴别要点

1. 本菌特征 革兰阳性球菌(容易染成阴性),菌落细小,触酶试验阴性,分解葡萄糖等糖类。

2. 与溶血孪生球菌的鉴别 见表 9。

试验结果试验结果
麦芽糖+山梨醇—(+)
蔗糖+碱性磷酸酶
乳糖酸性磷酸酶
覃糖APPAV
甘露醇VVP

注: +,90%以上菌株阳性; —,90%以上菌株阴性; —(+),少数菌株阳性; V,反应不定; APPA,丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸芳氨酶(alanine-phenylalanine-proline arylamidase)

菌名蔗糖甘露醇碱性磷酸酶镜下形态
麻疹孪生球菌+V成对、短链
溶血孪生球菌V+成对、四联状

注: +,90%以上菌株阳性; —,90%以上菌株阴性; V,反应不定

3. 与其他菌属的鉴别 见表12-9-7。

特性孪生球菌属无色藻菌属乳球菌属片球菌属创伤球菌
PYR+V+
LAPV++
葡萄糖产气+
七叶苷VVV+
万古霉素SRSRS

注: +,90%以上菌株阳性; —,90%以上菌株阴性; S,敏感; R,耐药; V,反应不定。PYR,吡咯烷酮芳基酰胺酶; LAP,亮氨酸氨基肽酶

4. 与颗粒链球菌属和乏养菌属的鉴别 麻疹孪生球菌的菌落形态与颗粒链球菌属和乏养菌属相似,但可以用卫星生长现象来鉴别。

(五) 麻疹孪生球菌药敏试验的药物种类选择

参见溶血孪生球菌章节。

(六) 麻疹孪生球菌结果解释与要点提示

麻疹孪生球菌是人体口咽及肠道内共生菌丛中的条件致病菌,已有引起心内膜炎左心房黏液瘤脓胸肺脓肿脓毒性休克脑脓肿骨髓炎腹膜炎等报道。

乳酸乳球菌 L. lactis

(一)乳酸乳球菌菌形态与染色

革兰阳性球菌,大小(0.5~1.2)μm×(0.5~1.5)μm,菌体呈圆形或卵圆形,成双或短链排列,无芽胞,无荚膜,无鞭毛(图 8)。

图 8乳酸乳球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

图 8乳酸乳球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

(二)乳酸乳球菌培养特征

在血琼脂平板上35℃培养18~24h,出现圆形、凸起、光滑、灰白色、α溶血的小菌落(图12-10-2),菌落与链球菌相似。在麦康凯琼脂平板上不生长。

(三)乳酸乳球菌生化反应

氧化酶试验和触酶试验均阴性,主要生化反应见表 11。

试验结果试验结果
麦芽糖+木糖
蔗糖V乳糖V
半乳糖+PYR+
甘露醇(+)精氨酸双水解酶+
山梨醇马尿酸钠
海藻糖+β半乳糖苷酶+

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;V,11%~89%菌株阳性;(),延迟反应;PYR,吡咯烷酮芳基酰胺酶

(四)乳酸乳球菌鉴别要点

1. 本菌特征 革兰阳性球菌,触酶试验阴性,分解糖类产酸不产气,PYR试验阳性;在胆汁七叶苷和6.5%NaCl肉汤中生长,在麦康凯琼脂平板上不生长。乳球菌生物学性状与肠球菌很相似。

2. 与肠球菌鉴别 乳酸乳球菌45℃不生长,pH9.6肉汤中不生长,在麦康凯琼脂平板上不生长。肠球菌则相反,45℃环境中、pH9.6肉汤中、麦康凯琼脂平板上均可生长。屎肠球菌分解阿拉伯糖产酸,乳酸乳球菌为阴性。

3. 乳球菌属内种之间鉴别 见表 12。

图 9 乳酸乳球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

图 9 乳酸乳球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

菌名麦芽糖蔗糖半乳糖甘露醇山梨醇蜜二糖松三糖海藻糖木糖乳糖PYRVP精氨酸双水解酶马尿酸钠β半乳糖苷酶
格氏乳球菌+V+(+)+V++++
棉子糖乳球菌++(+)ND+++++(-)
鱼乳球菌++++++++ND+
植物乳球菌+++++++
乳酸乳球菌 乳脂亚种+++++
乳酸亚种++/-+(-)+++(-)+/-++
霍氏亚种+++++

注:+,90%以上菌株阳性;-,90%以上菌株阴性;V,11%~89%菌株阳性;ND,无资料(),延迟反应;+/-,多数阳性,少数阴性。PYR,吡咯烷酮芳基酰胺酶

(五)乳酸乳球菌药敏试验的药物种类选择

乳酸乳球菌药敏试验的药物种类选择见表 13。

抗菌药物名称
必选青霉素或氨苄西林、头孢曲松、万古霉素、红霉素、克林霉素
可选美罗培南、四环素、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑
天然耐药克林霉素

注:上述药敏试验所选药物仅有MIC判读折点,具体参照CLSI M45-A3文件

(六)乳酸乳球菌结果解释与要点提示

乳球菌主要从乳制品和植物产品中分离出,可通过接触水产养殖的鱼类感染,是一种条件致病菌,可引起心内膜炎、关节炎、肝脓肿、菌血症、尿路感染、眼外伤、骨髓炎、脊柱关节炎、腹膜炎、非结石性胆囊炎等疾病。从无菌体液(血液、胸腔积液、腹水、穿刺液等)中分离出乳球菌可认为是感染菌,应进行药敏试验。乳球菌引起的严重感染应联合青霉素和庆大霉素治疗。

参考文献

周庭银, 章强强 主编. 临床微生物学诊断与图解(第4版)[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 2019.

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更新日期:2026-1-23

编制人:木木

审稿人:小藻