葡萄球菌属(Staphylococcus)形态与染色、培养特性、生化特性、鉴别特征和药敏试验

引言

葡萄球菌属(Staphylococcus)是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌。

包括，金黄色葡萄球菌(S.aureus)金黄色葡萄球菌金黄色亚种(subsp.aureus)、金黄色葡萄球菌厌氧亚种(subsp.anaerobius)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、施氏葡萄球菌(S.schleiferi)、松鼠葡萄球菌(S.sciuri)、松鼠葡萄球菌松鼠亚种(subspsciuri)、松鼠葡萄球菌肉亚种(subsp.carnaticus)、松鼠葡萄球菌啮齿亚种(subsp.rodentium)、中间葡萄球菌(S.intermedius)、海豚葡萄球菌(S.delphini)、腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)、路登葡萄球菌(S.lugdunensis)等66个种和亚种。

金黄色葡萄球菌，是最重要的致病葡萄球菌。

形态与染色

革兰阳性球菌,直径为0.5~1.5μm,成单、双、短链或不规则葡萄串状排列。

在液体培养基或脓液标本中,往往排列成双或短链,易误认为链球菌。

菌血症或脓毒症患者血培养标本，直接涂片，查见革兰阳性球菌，呈葡萄串样排列。

图 1 金黄色葡萄球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)

图 2 金黄色葡萄球菌伤口感染的脓液直接涂片(革兰染色)

图 3 金黄色葡萄球菌菌血症的血标本培养后涂片(革兰染色)

培养特性

在血琼脂平板上35℃培养18~24h,形成直径1~3mm 圆形、边缘整齐、凸起、湿润、奶油样、瓷白、浅黄色至橙黄色、周围有明显β溶血环的菌落,亦存在双圈溶血的菌落

部分菌株的菌落与典型菌落不同,呈黏液型

在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落

在Baird-Parker平板上菌落为圆形、凸起、光滑、湿润、直径2~3mm,呈灰色至黑色,边缘为淡色,周围为一浑浊带,在外层有一透明环

图 4金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

图 5金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的菌落特征(双圈溶血 ;48 h)

图 6 金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的黏液型菌落特征(48h)

图 7金黄色葡萄球菌在高盐甘露醇平板上的菌落特征(18~24h)

图 8金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker琼脂平板上的菌落特征(18~24h)

生化反应

触酶试验阳性,血浆凝固酶试验阳性,主要生化反应见表 1.

表 1 金黄色葡萄球菌主要生化反应

鉴别要点

1.本菌特征在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色,革兰阳性球菌,DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性,发酵甘露醇。

2.与各种临床有意义的葡萄球菌的鉴别见表 2。

表 2各种临床有意义的葡萄球菌鉴别的关键性试验

表 3萄球菌属内种间生化特性

4.与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型,镜下以葡萄串状排列为主,菌体较小而微球菌属为氧化型或无反应,镜下以四联排列为主,且菌体较大(图 9)。进一步鉴定见表 4。

图 9 金黄色葡萄球菌及微球菌纯培养的镜下形态左侧为金黄色葡萄球菌,右侧为微球茵

5.与链球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型,触酶试验阳性;链球菌属葡萄糖O/F试验为氧化型,触酶试验阴性

6.凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见表 5。

表 5凝固酶试验阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验

7.与其他菌属的鉴别见表 6

表 6萄球菌属与其他菌属鉴别的关键性试验

(五)药敏试验的药物种类选择金黄色葡萄球菌药敏试验的药物种类选择见表 7。

表 7金黄色葡萄球菌药敏试验的药物种类选择

注:①建议泌尿道感染报告的药物:呋妥因、诺氟沙星、磺胺类药、甲氧苄啶(U组有4种药),对于泌尿道分离株不常规报告的药物:大环内酯类、米诺环素、克林素,氯霉素:②脑脊液标本不应报告仅有口服剂型的抗菌药物,如头孢洛林、头孢西丁、克林霉素、阿奇霉素、红霉素、四环素、多西环素和喹诺酮类(如依诺沙星,加替沙星)。③呼吸道标本分离株不应测试和报告达托霉素的敏感性(达托霉素可在肺部被灭活)。④头孢洛林、奥利万星、特拉万星、特地唑胺,仅针对金黄色葡萄球菌报告.包括 MRSA。其他葡萄球菌不用报告。⑤本表列出的首选药物并不代表临床治疗首选药物。临床治疗首选应参考相关抗微生物治疗指南,具体参见CLSIM100-S26 及最新版本文件

结果解释与要点提示

(1)

葡萄球菌属在自然界分布很广,存在于空气、水、尘埃及皮肤上的葡萄球菌大多数无致病性当临床标本中分离到葡萄球菌时,应根据标本类型临床症状等因素综合判断是感染菌还是污染菌。

从痰液中分离出的金黄色葡萄球菌,若是优势菌,且痰液涂片结果合格,可考虑是感染菌。

从无菌体液标本(血液、胸腔积液、腹水、穿刺液等)中分离出金黄色葡萄球菌可认为是感染菌。

从尿液标本中分离出金黄色葡萄球菌,且菌落计数大于10"CFU/ml可认为是感染菌,若分离出腐生葡萄球菌和其他凝固酶阴性的葡萄球菌,且菌落计数大于10应结合临床做出判断若3次以上为同种菌应该考虑是感染菌。

从脓液、痰液中分离出的凝固酶阴性葡萄球菌多为定植菌。

(2)

有些检验人员在鉴定葡萄球菌时,将凝固酶试验阳性菌直接报告为金黄色葡萄球菌,而忽略了凝固酶试验阳性的其他葡萄球菌的存在,应根据表122-5进行进一步鉴别

值得一提的是,玻片法检测凝固酶易受很多因素影响而出现假阳性,应用试管法检测

(3)

耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)对多种广谱强效抗菌药物呈多重耐药性。

如果检测出耐甲氧西林的葡萄球菌菌株则报告对所有青霉素类、头孢菌素类(第五代头孢洛林除外)碳青霉烯类和内酰胺药/β-内酰胺酶抑制剂类抗菌药物耐药。

可检测苯唑西林或头孢西丁的敏感性,任何一种耐药即判断为MRSA。针对MRSA的治疗:轻度感染可选用SMZ、TMP和喹诺酮类,严重全身感染时可选用万古霉素、其他糖肽类药物或利奈唑胺。

(4)

临床感染葡萄球菌患者用喹诺酮类治疗3~4日后,原来敏感的葡萄球菌易产生耐药。所以对这类葡萄球菌需多次反复做药敏试验。

对大环内酯类耐药葡萄球菌包括固有耐药和诱导耐药。所以临床实验室需进行“D”试验以检测克林霉素诱导性耐药，根据“D”试验结果来报告克林霉素的耐药性。

参考资料

周庭银, 章强强 主编. 临床微生物学诊断与图解（第4版）[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 2019.

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更新日期：2025-11-6

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