革兰阳性球菌的基本特征、鉴定试验和生理生化特性介绍

来源：武汉市灰藻生物科技有限公司　　浏览量：102　　发布时间：2025-10-29 14:29:17

引言

革兰阳性球菌是指一群需氧、兼性厌氧、微需氧的细菌。

在自然界分布广泛,多存在于周围环境、人与动物的皮肤、黏膜等部位。

大多数为条件致病菌，种类较多。

在鉴定上较为复杂,可根据溶血、形态染色和触酶试验等进行初步鉴定。

革兰阳性球菌的鉴定

(一)革兰阳性球菌的基本特征

在血琼脂平板上生长,而在麦康凯、伊红亚甲蓝中国蓝琼脂平板上不生长,提示为革兰阳性球菌。但有些非发酵菌(如艾肯菌属、金氏杆菌属、心杆菌属等)在麦康凯平板上也不生长。

(二)革兰阳性球菌的基本鉴定试验要求

1.触酶试验是鉴定革兰阳性球菌的重要试验(任何革兰阳性球菌必须先做触酶试验),此试验不宜碰到血琼脂,因为红细胞内含有过氧化物酶,操作过程中若沾染红细胞可造成假阳性。

2.凝固酶试验是鉴定葡萄球菌的重要试验，此试验有玻片法和试管法。

须注意以下几点。

(1)有些葡萄球菌(里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌)凝固酶试验玻片法阳性,试管法却阴性,因其产生聚集因子。有些金黄色葡萄球菌玻片法阴性,试管法却阳性,因该金黄色葡萄球菌无结合凝固酶,有游离凝固酶。

(2)凝固酶试验最好使用EDTA抗凝的免血浆不提倡使用枸橼酸盐抗凝,因为有些细菌可分解枸橼酸盐,可出现假阳性。

(3)高盐甘露醇琼脂平板上的菌落不能用于凝固酶试验,因高盐可致菌体自凝。

(三)作为推测性鉴定的重要试验

1.菌落特征

(1)溶血

血琼脂平板上的溶血有助于一些细菌的初步鉴定,如金黄色葡萄球菌、链球菌属等。

①α溶血:α溶血使菌落周围的血液部分溶解,其结果是菌落周围有一个草绿色溶血环,疑似肺炎链球菌和草绿色链球菌。

②β溶血:β溶血菌落周围的血液完全溶血,是红细胞完全被溶解所致,如A群β溶血链球菌(化脓链球菌)产生宽阔清晰的溶血环(图 1);

图 1 溶血环左图为α溶血,中图为β溶血,右图为γ溶血

B群β溶血链球菌(无乳链球菌)产生一个狭窄的分散的溶血环。

③γ溶血:又称不溶血。呈灰白色细小菌落,在菌落周围无溶血环

1)α溶血性链球菌推测性鉴别见表 1

表 1 α溶血性链球菌鉴别的关键试验

2)β溶血性链球菌推测性鉴别见表 2.

表 2 β溶血性链球菌鉴别的关键试验

3)γ溶血性链球菌推测性鉴别见表 3.

表 3 γ溶血性链球菌推测性鉴别. γ溶血性链球菌推测性鉴别见表 3.

(2)卫星现象:乏养菌属和颗粒链菌属。

(3)菌落表面:粗糙、光滑、黏液型(图 2)皱纹、放射状等

图 2 黏液型菌落特征A.金黄色葡萄球菌;B.肺炎链球;C.溶血葡萄球菌

2.镜下形态

(1)革兰阳性球形、葡萄串状、单个、成双,疑似葡萄球菌属。

(2)革兰阳性球状、球杆状、链状(短链)排列、链的长短不一(液体培养基中为长链,固体培养基中为短链,短链由4~8个细菌组成,长链可达20~30个),疑似链球菌属

(3)革兰阳性矛头状、成双或短链排列,宽端相对、尖端相背,疑似肺炎链球菌。

(4)革兰阳性球杆状、成双、链状,疑似乳球菌属、无色藻菌属、格鲁比卡菌属等。

(5)革兰阳性球状、球杆状,疑似乏养菌属等

(6)革兰阳性球状、成双、链状、成簇,疑似气球菌属、孪生球菌属、创伤球菌属、片球菌属等。

(7)革兰阳性球杆状、成双、四联状,疑似差异球菌属等。

(8)革兰阳性球状、成双、成簇,疑似口腔球菌属等。

(9)革兰阳性球状、成簇、四联状,疑似微球菌属等。

注意:溶血李生球菌扁平的侧面相邻,常是双球状

3.凝固酶试验凝固酶试验阳性的葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色亚种、金黄色葡萄球菌厌氧亚种、施氏葡萄球菌聚集亚种、中间葡萄球菌、S.lutrae、猪葡萄球菌(11%~89%阳性)。值得注意的是,如果菌落特征、镜下形态符合葡萄球菌,且触酶阳性,应先进行凝固酶试验,阳性可能为金黄色葡萄球菌,阴性再进一步鉴定。

4.高盐甘露醇试验高盐甘露醇试验阳性的葡萄球菌:金黄色葡萄球菌。但有报道一些少见的凝固酶阴性葡萄球菌高盐甘露醇试验也阳性,故应用凝固酶试验验证。

5.CAMP试验CAMP试验阳性的革兰阳性球菌:B群(无乳)链球菌。

6.杆菌肽敏感试验杆菌肽敏感的革兰阳性球菌:A群链球菌(化脓链球菌)。

7.Optochin试验 Optochin 试验阳性的革兰阳性球菌:肺炎链球菌。

8.吡咯烷酮芳基酰胺酶(PYR)试验PYR试验阳性的革兰阳性球菌:肠球菌、化脓链球菌、绿色气球菌和某些凝固酶阴性葡萄球菌等。直接取细菌培养物,涂在含有PYR的纸片上,置35℃孵育5min,滴加显色剂,若阳性则可显红色,无颜色改变为阴性。

9.触酶试验

(1)触酶试验阳性的革兰阳性球菌:葡萄球菌属、微球菌属、口腔球菌属(Slomatococcus)、动球菌属(Planococcus)、克民库克菌属(Kocuriakristinae)、差异球菌属(Alloiococcus)、黏滑罗氏(Rothiamucilaginosa )等。它们之间的鉴别见表 4。

表 4触酶阳性的革兰阳性球菌属的鉴别

(2)触酶试验阴性的革兰阳性球菌:金黄色葡萄球菌厌氧亚种、解糖葡萄球菌、链球菌属、肠球菌属、乏养菌属、气球菌属、Dolosioccus、狡诈球菌属(Dolosigranulum)、费克蓝姆菌属(Facklamia)、李生球菌属(Gemella)、格鲁比卡菌属(Globicatella)、创伤球菌属(Helcococcus)、懒惰球菌属(Lgnavigranum)乳球菌属(Lactococcus)、无色藻菌属(Leuconostoc)、片球菌属(Pediococcus)、颗粒链菌属(Granulicatella)、四联球菌属(1ètragenococcus),漫游球菌属(Vagococcus)等它们之间的鉴别见表 5。

表 5触酶试验阴性的革兰阳性球菌鉴别的关键性试验