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产品名称 | BES-1A1.6 Transformed Human BRONCHIAL EPITHELIUM |
别称 | |
形态特征 | |
特征特性 | |
生长特性 | |
主要用途 | |
培养条件 | |
培养基 | |
使用方法 | 冷冻细胞的处理程序 - 收到后尽快开始培养。 - 在 37°C 水浴中快速搅拌解冻。解冻应快速(40-60 秒内)。冰融化后,将安瓿从水浴中取出,并在室温下浸入 70% 乙醇中。从此时起的所有操作都应在严格的无菌条件下进行。 - 细胞以两种不同类型的玻璃安瓿提供。一种是标准安瓿,必须用浸入乙醇的锋利锉刀在其颈部刻痕。一侧必须有一个长度约为 1/8 英寸的明确锐利刻痕。第二种类型是预先刻痕的,可以通过安瓿颈部周围的金带进行识别,并且不应使用锉刀进行刻痕。- 在多个安瓿之间折断安瓿颈部。 - 转移细胞悬液并用推荐的培养基稀释。离心(7-900 rpm,5-7 分钟)。重新悬浮在 7 ml 培养基中,然后分装到有涂层的 25 cm 方形培养瓶中(稀释比例见上文具体批次信息)。在37°C、5% CO2、空气气氛下培养。由于在细胞回收过程中避免培养基碱度过高很重要,因此建议将培养基放入在添加安瓿内容物之前,根据需要调整培养瓶、试管等和 pH 值。请注意,培养基中的碳酸氢盐含量将决定是否需要含有 CO2 的气氛。- 没有必要除去冷冻添加剂。然而,如果需要,可以在解冻后24小时更换培养基以除去保护性冷冻添加剂(二甲基亚砜)。如果需要立即除去冷冻添加剂,或者获得更浓缩的细胞悬浮液,则将上述稀释的悬浮液以约 125 xg 离心 10 分钟,弃去液体并按照特定批次中给出的稀释比例用生长培养基重新悬浮细胞液体更新每 2-3 天一次。传代程序去除培养基,添加新鲜的 0.5% PVP 胰蛋白酶 - EDTA 溶液直至细胞分离。添加培养基并离心沉淀细胞。重悬于新鲜的 LHC-9 培养基中。以 1.5-3 x 10(3) 细胞/cm 的密度分配到涂层烧瓶中。 sq.涂层混合物为:人纤连蛋白,10 °g/ml,Vitrogen 100,30 °g/ml,牛血清白蛋白,10 °g/ml,溶解在 LHC 培养基中(参见上文参考文献)。将细胞冷冻在含有 HEPES 加 1% PVP、10% 胎牛血清和 7.5% DMSO 的 L15 培养基中。 |
传代方法 | |
规格 | |
保存说明 | |
注意事项 | 更多信息请前往ATCC官网获取 |
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