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lambdaMGU2

  • 货号 : HZB375283
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ATCC 77367

  • 规格 :
  • 品牌 : HZBMC
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产品名称 lambdaMGU2
别称
形态特征
特征特性 类型:克隆,未被支原体污染,载体类型:噬菌体
生长特性
主要用途 用于构建 cDNA 文库的载体 允许对插入片段进行正选择的载体 允许产生单链 DNA 的载体
培养条件
培养基
使用方法 启动并扩增 ATCC 噬菌体 Lambda 克隆和载体 制作新鲜的平板细菌。将大肠杆菌宿主菌株在含有 0.2% 麦芽糖的培养基中培养过夜或至少培养至 A600 = 0.4（以获得更高的效价）。在低速离心机中旋转细胞。在 0.4 倍体积的 10 mM MgSO4 或 SM 缓冲液中重悬。储存于 4°C。将 100 µL 宿主悬浮液移至无菌试管中。添加 3 mL。含有 0.2% 麦芽糖的温 (50°C) LB lambda 顶层琼脂（见下文）并轻轻混合。倒在盘子上。让板凝固。根据说明打开小瓶。无菌条件下向冻干颗粒中添加 0.3 至 0.4 mL 液体介质（SM 或 10 mM MgSO4）并充分混合。在刚倒出的细菌的草坪上发现一两环。 37°C 孵育过夜。新鲜的盘子会产生更大的斑块。从琼脂上切下噬菌斑，将其添加到 0.5 mL 的 10 mM MgSO4 或 SM 缓冲液中，并在 4°C 下保存过夜。将 100 µL 噬菌体稀释液添加到 100 µL 准备好的电镀细菌中，并轻轻混合。在 37°C 水浴中孵育 20 分钟，让噬菌体吸附。添加 3 mL。含有 0.2% 麦芽糖的 LB lambda 顶层琼脂（见下文）并轻轻混合。倒在盘子上。 37°C 孵育过夜。新鲜的盘子会产生更大的斑块。将打开的板倒置在氯仿饱和的吸附纸上 10 分钟。将 7.5 mL 10 mM MgSO4 或 SM 缓冲液添加到板中，并在室温下静置 1 小时或在 4°C 中静置过夜。收集并保存板上的液体。这应该是高滴度裂解物。如果要保存几天以上，请添加几滴氯仿。 LB Lambda 顶层琼脂培养基：NaCl、5 g 胰蛋白胨、10 g 酵母提取物、5 g 蒸馏水至 1 L 121°C 灭菌 15 分钟。冷却至约 50°C 并添加以下无菌溶液。 1M CaCl2，5 mL MgSO4 H2O，终浓度为 0.2% w/v 50% 麦芽糖，5 mL
传代方法
规格
保存说明 2°C 至 8°C
注意事项 更多信息请前往ATCC官网获取
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