实验指南 | 肺炎链球菌的形态特征、培养特性、鉴别与药敏分析

引言

肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae），这一具有重要公共卫生意义的病原体，是引发社区获得性肺炎、侵袭性感染等多种疾病的罪魁祸首。其独特的生物学特性、临床表现以及对抗菌药物的敏感性，对疾病的诊断、治疗乃至预防策略的制定至关重要。本文将深入剖析肺炎链球菌的形态特征、培养特性、生化反应，以及与其他相近菌种的鉴别要点，并就药敏试验的药物选择与结果解读提供详细指导，旨在为临床医生及相关科研人员提供全面而精准的肺炎链球菌知识框架，助力疾病的准确识别与有效防控。

形态与染色

革兰阳性球菌，呈矛头状，成双或链状排列，宽端相对、尖端相背，有荚膜。很少呈链状，所形成的链为短链状（细菌数<6个），在血培养阳性标本中成双排列。在痰标本中大多数成双排列，少数呈鱼群状排列。

图1、A：肺炎链球菌纯培养的镜下形态(革兰染色)，B：血培养阳性标本直接涂片镜下形态(革兰染色)，C：肺炎链球菌肺炎痰标本直接涂片，矛头状，成双或短链状，有荚膜，也可无荚膜(革兰染色)，D：肺炎链球菌肺炎痰标本直接涂片，鱼群状排列(革兰染色，箭头所示)

培养特性

在血琼脂平板上35℃5%~10%CO2环境中培养18~24h形成细小、圆形、中央呈脐窝状、表面光滑、湿润、灰色、扁平、直径0.5~1.5mm的菌落，周围有宽大的草绿色溶血环。继续培养，菌落会自溶，只残留菌落痕迹。部分肺炎链球菌可形成水滴状、湿润、透明的黏液型菌落。

图2、从左至右分别为肺炎链球菌在血琼脂平板上的菌落特征（18~24h），痰标本肺炎链球菌在血琼脂平板上的菌落特征（18~24h；箭头所示），部分菌株湿润、透明的黏液型菌落（18~24h)

生化反应

触酶试验阴性，荚膜肿胀试验阳性，胆盐溶解试验阳性，主要生化反应见下表。

图3、肺炎链球菌胆盐溶菌阳性（澄清、透明）（左侧试管澄清、透明，示胆盐溶菌阳性；右侧试管浑浊，为草绿色链球菌胆盐溶菌阴性对照）

图4、肺炎链球菌胆盐溶菌阳性（平板法、箭头所示）

表1、肺炎链球菌主要生化反应

注：“+”，90%以上菌株阳性；“-”，90%以上株阴性；“S”，敏感

鉴别要点

1、本菌特征革兰阳性双球菌，矛头状成对排列，宽端相对、尖端相背，菌落细小，中央凹陷，周围有宽大的草绿色溶血环，分解菊糖，胆盐溶菌试验阳性，Optochin试验敏感。

2、与草绿色链球菌的鉴别，两者镜下形态相似，且均为α溶血，鉴别见下表。

图5、肺炎链球菌与草绿色链球菌镜下形态（革兰染色）左图为草绿色链球菌；右图为肺炎链球菌

表2、α溶血性链球菌鉴别的关键性试验

注：“+”，90%以上菌株阳性；“-”，90%以上株阴性；“*”，偶尔一些草绿色链球菌胆汁七叶苷弱阳性

药敏试验的药物种类选择

肺炎链球菌抗菌药物选择下表。

表3、药敏试验的药物种类选择

注：①脑脊液中的肺炎链球菌应常规报告青霉素、头孢噻肟、头孢曲松或美罗培南的MIC。左氧尔沙星敏感：可预报其对吉米沙星和莫西沙星也敏感，反之不可。青霉素：无纸片扩散法折点，可用西林纸片法结果（当直径>20mm）预测青素的敏感性，或直接检测青霉素的 MIC，不能报告苯唑西林的敏感性。②目前第二、三代头孢菌素无纸片扩散法折点，需要进行MIC法检测。③药敏试验必选药物并不代表临床治疗首选药物，临床治疗首选应参考相关抗微生物治疗指南。具体参照CLSIM100-S26版及最新版本。

结果解释与要点提示

1、肺炎链球菌为口腔和鼻咽部正常菌群，一般不致病。当机体抵抗力下降时，如在寒冷刺激、感冒和麻疹后，可引起大叶性肺炎或支气管肺炎，还可弓起化脓性脑膜炎、中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑脓肿、血症和心内膜炎等。近年来耐青霉素的肺炎链球菌（PRSP）及多重耐药（MDR）菌株的增加，给临床治疗带来一定的困难。

2、脑脊液分离的肺炎链球菌应常规报告青霉素、头孢肟、头孢曲松或美罗培南MIC，这类菌株的万古霉素敏感性检测可以用MIC法或纸片扩散法。

3、苯唑西林抑菌圈直径≥20mm的肺炎链球菌分离株对青霉素敏感（MIC<0.06ug/ml）。当苯唑西林抑菌圈直径<19mm时，应检测青霉素和头孢噻肟、头孢曲松或美罗培南的MIC值，因为抑菌圈直径<19mm时，可能是青霉素耐药、中介或某些敏感株。苯唑西林抑菌圈直径<19mm的菌株，在没有做青霉素MIC试验之前，不能报告为青霉素耐药。

总结

肺炎链球菌，一种革兰阳性、矛头状、成对或短链排列的球菌，以其特有的菌落特征、生化反应及对特定药物的敏感性，区别于其他链球菌。其在人体免疫功能下降时引发肺炎、脑膜炎等多种严重疾病，且近年来耐药菌株的增多，加大了治疗难度。本文详尽阐述了肺炎链球菌的形态学、培养特性和生化特性，强调了其与草绿色链球菌的鉴别要点，列举了药敏试验的药物选择，并对结果解释进行了明确指导。特别指出，脑脊液中肺炎链球菌的药敏测试应常规包括青霉素、头孢噻肟、头孢曲松或美罗培南的MIC测定，且临床治疗决策应参考抗微生物治疗指南，而非单纯依据药敏试验必选药物。通过理解并掌握这些关键信息，临床医生能更准确地识别肺炎链球菌感染，合理选择抗生素，应对日益严重的耐药问题，从而提升患者治疗效果与预后。

【相关资源】

名称：肺炎链球菌 | Streptococcus pneumoniae

菌株编号：HZB233655

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更新日期：2024-04-16